Bonsoir à tous,
Je suis entrain de faire mon compte rendu de tp de génétique quand j'ai soupçonné une erreur dans les calculs réalisés au cours de la séance...??

J'aimerais savoir ce que vous en pensé...

Notre matériel est une souche mutante ORT128 de Saccharomyces Cerevisiae, mutée pour le gène h de la chaine de biosynthèse de l'adénine, se qui la rend auxotrophe à l'adénine et lui confère également une couleur rouge-orangée (arrêt à production d'Amino Imidazole Ribotide de coloration rouge)...

Nous avons deux séries de boites de Petri, la première est en milieu complet (pour étudier l'effet létal des UV) et la seconde est en milieu minimum (pour étudier l'effet mutagène des UV).

Mon problème se trouve dans la série en milieu complet, (effet létal).

Notre expérience :

Nous avons une solution B, de concentration : 10^8 cellules/ml


Pour notre témoin, nous allons réaliser une suite de dillution (jusque 5.10^5)


*de B on prélève 0.1ml... n=C*V=10^8*0.1=10^7 cellules

*nous mettons ce 1/10 de ml dans 4.9 ml de solution saline :
où C=n/V = 10^7/5 = 2*10^6 cellules/ml

*de cette solution nous prenons 0.1ml : n=0.1*2*10^6=2*10^5 cellules

*nous le mettons dans 9.9ml de solution saline : C=(2*10^5)/10=2*10^4 cellules/ml

*de cette solution nous prenons 0.1ml : n=0.1*2*10^4=2*10^3 cellules

*que nous mettons dans 9.9ml de solution saline : C=(2*10^3)/10=200 cellules/ml
A la fin on arrive à une dilution de 5*10^5

Tout cela est en théorie...
Maintenant en pratique..

Dans notre boite témoin, au bout d'une semaine nous avons pu comptabiliser 24 colonies, comme à l'origine une colonie est une cellule qui se fixe et se divise alors nous y avons mis 24 cellules...
Ces cellules introduites étaient contenues dans 0.2ml...

Si je calcul la concentration de la solution introduite je trouve 24/0.2=120 cellules/ml

Je fais le calcul de la survie (pour moi c'est : ):=(nombre de cellules vivantes)/(le nombre de cellules introduites)=120/200=60%

En faisant ainsi j'obtiens pour mes 3 boites de Pétri :

Do(témoin 0s UV), 24 colonies/cellules (moyenne)
V(introduit)=0.2ml Facteur dilution : 5*10^5
Concentration Théorique 200Cellules/ml
Concentration pratique 120Cellules/ml
Survie 60%

D1(20s UV) 80.5 colonies/cellules
V(introduit)=0.2 ml facteur d : 8*10^4
Concentration théorique : 1250cellules/ml
concentration pratique : 402.5cellules/ml
survie 32.2%

D2(40s UV) 478 colonies/cellules
V(introduit)=0.2ml facteur d: 10^4
concentration théorique : 10^4 cellules/ml
concentration pratique 2390cellules/ml
survie 23.9%

Alors que nous (élèves+professeurs), un taux de survie de :

Do 100% (celui ci, est donné hypothétiquement, comme milieu complet alors on suppose que 100% des levures vont se développer, enfin je pense que c'est le raisonnement suivi...??)

Pour calculer la survie de D1 voilà la formule qu'ils nous proposent :

((([ade-]+[ade+])de D1)*100) / ([ade-]+[ade+] de Do)

D1 53.67% = (3.22*10^7)/(6*10^7)

3.22*10^7=402.5(C D1 pratique)*8*10^4 (facteur dilution)

D2 39.83% =(2.39*10^7)/(6*10^7)

2.39*10^7=2390 (C D2 pratique)*10^4 (facteur dilution)


J'aimerais avoir votre avis sur quel réponse est la plus correcte...
pour moi ma solution est plus "raisonnable" car je ne comprend pas leur formule car les facteur de dilution sont différents.

Merci de m'avoir lu, c'était long je sais,