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coloration avec o-dianisidine

  1. tortuga

    Date d'inscription
    octobre 2004
    Localisation
    Norwich, UK
    Messages
    174

    Question coloration avec o-dianisidine

    bonjour à tous!

    tout d'abord, félicitations pour ce forum que je consulte parfois et où j'apprends pas mal de choses à chaque coup!

    dans le cadre d'une étude sur les haloperoxydases (HPO) et la relation plante / pathogène pour un cours de phytopathologie, j'ai vu dans un article qu'ils utilisaient une façon de colorer les hyphes d'un pathogène (botrytis cinerea en l'occurence) pour mettre en évidence la présence de HPO avec de l'o-dianisidine (3,3'-Dimethoxybenzidine pour les intimes) en présence de NaBr. le résultat était une coloration brunatre lorsque NaBr est présent et pas de coloration sans NaBr.

    Malheureusement, dans l'article, ils en font simplement mention, sans trop détailler. Connaissez-vous le mécanisme chimique de cette coloration et éventuellement le protocole?

    Merci et bonne journée!


     


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  2. nayeki

    Date d'inscription
    novembre 2004
    Localisation
    Dundee
    Messages
    333

    Re : coloration avec o-dianisidine

    Je connais pas cette technique mais ça m'étonne vraiment que l'article ne cite pas de référence, c'est OBLIGATOIRE même si c'est indirect...


    Sinon, google
    Chacun pense ce qu'il veut... moi, je veux ce que je pense.
     

  3. tortuga

    Date d'inscription
    octobre 2004
    Localisation
    Norwich, UK
    Messages
    174

    Re : coloration avec o-dianisidine

    Bonjour

    d'abord, merci pour cette rapidité!

    je suis aussi étonné que toi... dans l'article, ils ne montrent pas leurs résultats pour cette manip (le bon vieux "data not shown" a bon dos! ), ils n'en parlent pas dans la partie "méthodes et matériel"
    donc je me suis dit que c'est peut-être quelque chose de très basique lorsqu'on pratique la phytopathologie et qu'il me manquait simplement des notions!

    ils utilisent l'o-dianisidine egalement autre part dans l'expérience, mais comme substrat pour détecter l'activité enzymatique sur des gels (pas dans le mycelium) et là ils en parlent (un peu) dans methods & materials mais rien de bien précis pour le néophyte que je suis...

    google, j'ai essayé mais sans succès (ce qui m'étonne également)

    si ca peut vous aider, l'article est disponible ici: FEMS Microbiol Lett. 2002 Nov 19;217(1):121-4. (la description de la manip en question est dans le premier paragraphe de la p.123)

    encore merci et bonne journée!
     

  4. tortuga

    Date d'inscription
    octobre 2004
    Localisation
    Norwich, UK
    Messages
    174

    Re : coloration avec o-dianisidine

    bon et ben, je me réponds tout seul puisque j'ai trouvé!
    par avance désolé d'avoir envoyé un message inutile donc...

    pour ceux que ca intéresserait éventuellement:
    l'ortho-dianisidine en présence de NaBr et de peroxyde d'hydrogène va s'halogener grâce à l'haloperoxydase; et c'est la forme oxydée de l'o-dianisidine (diméthoxy-3,3'-benzidine) qui est brunâtre!

    si un phytopathologiste ou quelqu'un qui s'y connait se perd sur ce thread et pense que j'ai faux, merci de me le dire

    bonne journée
     


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