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Amplification PCR

  1. bio micro

    Date d'inscription
    novembre 2009
    Messages
    1

    Amplification PCR

    Bonsoir à tous,
    Je suis une étudiante en Mastère 2, j'ai un problème de PCR qui se magnifeste en une formation de diméres d'amorces. j'ai utilisé une quantité plus faible des amorces afin d'éviter la formation des dimères,mais dans ce cas aucune ampification n'a été détecté.
    les dimères d' amorce ayant un taille > à 250pb, ne disparaissent pas meme après la purification du produit PCR, ce qui ne me permet pas d'avoir un résultat + pour le séquençage.
    veuillez m'aider pour résoudre ce problème.
    merci d'avance
     


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  2. Zellus

    Date d'inscription
    avril 2008
    Localisation
    Palaiseau
    Âge
    29
    Messages
    880

    Re : Amplification PCR

    Bonjour et bienvenue sur Futura !

    Tu es sûre que c'est un dimère d'amorces ? Parce que c'est très grand 250 pb quand même ... C'est peut-être juste un amplifiat non spécifique.
    Sinon tu purifies ton amplifiat comment ? Tu as essayé de le purifier à partir du gel d'agarose ?
     


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