bêta actine dans la PCR !!

[cysto]

Bonjour tout le monde !
Quel est svp le rôle de la bêta actine dans la PCR ??? précisement la PCR-RT ... Merci

[Jean-Luc P]

C'est le gène amplifié dans ton protocole, peut-être ? Ou l'ARN messager ?

[cysto]

En ce moment, j'analyse un article qui traite l'échinococcose du point de vue immunité et culture cellulaire ...pour détérminer les cytokines impliquer dans la réaction immunitaire ...je fais donc une PCR et je rajoute des amorce d'IFN, TNF, IL et aussi la bêta actine ....donc à quoi sert cette bêta actine ??!!! A vrai dire ,je sais même pas à quoi sert cette PCR !! c'est quoi le but d'amplifier ces génes là ??? Merci de m'aider ,je suis vraiment égarée et mes délais sont brefs

[descmarc]

Bonjour,

si c'est une RT-PCR classique la béta actine sert de controle positif, le gène est forcément exprimé donc tu dois avoir une bande pour ce gène ceci te permet de conclure sur les autres gènes notamment dans le cas ou tu n'as pas de bande tu ne peux pas dire que c'est parce que l'ARN était dégradé etc car l'actine marché.....2 émement l'actine peux te servire à semi-quantifié l'expression des autres gènes, l'actine est un gène dit de ménage ou housekeeping gene. Il est tout le temps transcrit à un niveau maximal donc si une bande observé est deux fois moins intense que la bande actine tu pourra dire est bien voila tel gène est deux fois moin exprimé que le gène actine etc....

j'éspére que j'ai été clair et que j'ai répondu a ta question

cordialement

[cysto]

Ohhh que oui, c'est bon j'ai compris : merci beaucouppppp descmarc...

[Jean-Luc P]

Oui enfin bon il fallait dire que c'était une RT-PCR pour commencer. Ensuite qu'il s'agissait d'amorces, ou de gène de la beta-actine, et non la protéine elle-même.

Cela aurait facilité le travail des lecteurs !