[Exercice] Dosage de la quantité d'ADN
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Dosage de la quantité d'ADN



  1. #1
    Elfe09

    Dosage de la quantité d'ADN


    ------

    Salut !

    "La durée totale du cycle cellulaire peut être mesurée à partir du temps de doublement
    d’une population de cellules en croissance exponentielle. Une culture synchrone de cellules eucaryotes est maintenue dans un milieu nutritif complet (DMEM) en étuve à 37°C. A différents temps, on prélève des aliquotes pour doser la quantité moyenne d’ADN par cellule."

    Et donc on me demande par quelle technique peut-on faire ce dosage ?
    J'ai pensé à la technique de séparation par électrophorèse et à la centrifugation.
    Dans une electrophorèse je sais qu'il y a un champ électrique et donc les molécules doivent être ionisés pour migrer. Cela tombe bien parce les acides nucléiques portent des charges négatives.

    La centrifugation est intéressante aussi car a la fin on a des filaments d'ADN à part et c'est facile de doser leur quantité.

    Donc voilà, laquelle de ces technique est la mieux pour mon cas ?
    Merci !

    -----

  2. #2
    gg31100

    Re : Dosage de la quantité d'ADN

    Bonjour,

    Il y a plus simple je penserai plutôt à la cytométrie en flux. C'est ce qui est principalement utilisé en biologie cellulaire pour étudier le cycle cellulaire. Vous marquez l'ADN dans vos cellules avec un intercalant et le cytomètre vous donne l'intensité de fluorescence ce qui correspondra à la proportion d'ADN dans vos cellules. Mais à vérifier je ne suis pas spécialiste de la biocell!

    GG
    Dernière modification par gg31100 ; 24/04/2014 à 20h06.

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