Quand le western blot se met à "déconner", il faut remettre en question tout le matériel et toutes les solutions utilisées.... c'est une enquète minutieuse qui pourra te permettre de résoudre le problème.
Commence par réutiliser des boîtes, ça te permettra de savoir si les problèmes sont dus aux tubes falcon, et remets en question tout ce qui a pu changer dans ta technique depuis que les westerns ne fonctionnent plus bien:
- vérifie tous tes produits (fabrication des gels, des différentes solutions genre celles que tu utilises pour diluer tes anticorps). Si tu as le moindre doute sur un produit (date de péremption, conservation à la mauvaise température, cpontamination, ...): utilise un produit neuf. Vérifie que tu n'as pas changé de fournisseur pour un des produits, ou de marque de lait en poudre si tu en utilises. Refais toutes tes "sauces".
- demande-toi si les problèmes n'ont pas commencé au moment où tu as commencé un nouveau tube d'anticorps (si plusieurs types de western blot posent problème, utilisent-ils tous le même AC secondaire?). Si tu as changé de tube d'anticorps, s'agit-il du même lot et de la même date de fabrication que l'ancien?
- vérifie aussi tes produits de révélation.
Cette "enquète" peut être longue et fastidieuse, mais c'est la seule solution pour isoler le fautif dans la technique....
Bon courage, donne-nous des nouvelles!


