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H2S et DMPPDA réaction d'oxydation
Bonjour,
je souhaite faire des dosages plasmatiques de H2S.
La méthode utilisée est celle du bleu de méthylène(comme pour la question de raf la menace).
Voici le protocole: Ajout d' Acétate de Zn (0,5%) + Plasma, Ajout de DMPPDA (dans du H2SO4 à 4M) puis de FeCl3(dans H2SO4 à 0,015M). Et enfin ajout de TCA 10% suivi d'une centrifugation pour enlever les protéines. Lecture au spectro à 670nm.
Mon premier problème est de savoir si les protéines contenant du souffre vont réagir (et si cela va rester après la centrifugation) et si il y a d'autres molécules qui vont réagir tels que HS-, les sulfites, etc...
De même j'ai un problème car dans certains cas la solution devient rouge(ce qui me donne des valeurs négatives par rapport au blanc), pourquoi et comment y remédier(est-ce le DMPPDA qui s'oxyde?,...).
Je sais que j'en demande beaucoup...
Merci d'avance pour une/des réponse(s).
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