[Biotechnologie] Pcr

[brunop]

Bonjour,
Quelques petites questions concernant la PCR :

Existe t'il un calcul qui puisse me permettre de calculer la dilution d'une amplification par pcr ?
Qu'est ce que le Crossing Point (Cp)?
Merci,

[calimeroz]

Hello,

J'ai pas la réponse à ta question ...

Par contre, comme j'ai fait ma première PCR hier, j'en ai aussi une.

Comment le bromure d'éthidium se fixe entre les paires de base ? Il se fixe aux bases ? aux sucres ? aux phosphates ?

Pourquoi le bromure d'éthidium (fixé au DNA) est-il davantage visible aux UVs que le bromure d'éthidium (dans le gel (d'agarose)) ?

Merci si vous comprenez ce que je veux dire

A plus

Cal.

[nayeki]

Hello,

Le bromure d'ethidium est un intercalant, il se fixe entre les bases azotees.

Pour ta question concernant la detection, il n'est pas plus "visible" lorsqu'il est fixe a l'ADN, il est juste plus concentre

[calimeroz]

Yeah merci pour ta fulgurante réponse, j'ai meme pas eu le temps de me laver les dents

A plus !

[nayeki]

Citation:

Posté par brunop

Bonjour,
Quelques petites questions concernant la PCR :

Existe t'il un calcul qui puisse me permettre de calculer la dilution d'une amplification par pcr ?
Qu'est ce que le Crossing Point (Cp)?
Merci,

Premiere question: je la comprends pas en fait

Deuxieme:
Cela concerne la PCR quantitative.

[JeanPhir]

Citation:

Posté par nayeki

il n'est pas plus "visible" lorsqu'il est fixe a l'ADN, il est juste plus concentre

Réponse me semble-t-il un peu rapide, autant la rectifier même trois ans après . On trouve dans Wikipedia que ce produit est d'une couleur "20 fois plus intense lorsqu'il est lié à l'ADN". La couleur, la fluorescence dépend de beaucoup de facteurs et il suffit de très peu de modifications au niveau moléculaire pour modifier le phénomène : rien d'étonnant à ce que sa fixation modifie sa réactivité.