La Pcr

biologiste2002 · 07/09/2006, 01h24

salut,svp c'est quoi l'extraction d'ADN et quoi le PCR.

Cococcinelle · 07/09/2006, 08h48

Bonjour,

"extraction d'ADN" ca veut dire isoler les molecules d'ADN, c'est a dire le materiel genetique, du reste des composants des cellules.
Et PCR signifie Polymerase Chain Reaction, ou en francais reaction de polymerisation (sous entendu de l'ADN) en chaine. Cette technique permet d'amplifier l'ADN. En faisant court, l'enzyme ADN polymerase catalyse la reproduction a l'identique d'un brin d'ADN au cours d'un cycle de reaction (plusieurs etapes a differentes temperatures) , et on fait plusieurs cycles de reaction a la suite (en chaine donc) pour obtenir apres n cycles 2[exp]n[exp] fois plus de molecules.
Si tu fais une recherche sur ce forum ou sur google tu trouveras plus de details.

bib160 · 07/09/2006, 11h25

bonjour a toutes et a tous

l article wikipedia "réaction par polymerisation en chaine" est tres bien fais

Vinc · 07/09/2006, 12h43

Salut!
Juste comme ça mais la bibliothèque de biologie a été conçue aussi pour ce type de questions

Voici la page dédiée aux technique avec quelque sites dont un qui t'expliquera clairement ce qu'estla PCR:

http://forums.futura-sciences.com/post613101-10.html

A+
Vinc

Laotze · 01/12/2007, 00h36

Bonjour à tous!

J'ai aussi une question à poser pour la PCR:

J'ai bien compris le fonctionnment de l'amplification de la séquence analysée, mais après qu'est ce qu'on fait de ces séquences cibles la plupart du temps?

Faire un séquençage? (la question est bête mais je ne vois pas d'autres utilités de PCR classique)

Merci d'avance!

**Yoyo** · 01/12/2007, 01h26

salut

eh bien apres, tu peux cloner le fragment de PCR pour l'etudier, cce fragment peut etre un gene, un element du promoteur etc...
tu peux aussi te servire de la pCR pour cribler des colonies, faire des sondes etc...

YOyo

Squalor · 01/12/2007, 12h37

YOP!

J'ajoute: Genotyping (ca rejoint l'idée de criblage, mais c'est juste pour préciser que l'on peut faire cela sur des cellules eucaryiotes en culture, venant d'un tissus...), Analyse de la quantitée de mRNA cible (RT-PCR)

amicalement,

Greg

Laotze · 02/12/2007, 17h48

Salut à tous!

Merci pour toutes ces réponses!

Ignare en la matière, je voudrais savoir comment on peut faire un pcr? Parce qu'il faut avoir un minimum de savoir sur la séquence amplifier: site des amorces etc.

...Et, lors d'une pcr classique (non pcr en temps réel), pourquoi on dit que le résultat est qualitatif? Parce que je croyais que même si la précision de quantificationest médiocre, on peut toujours différencier deux quantités de ADN amplifié, l'une étant au moins 10 fois plus grande que l'autre.

...enfin, pour une pcr en temps réel, on dit pouvoir suivre l'amplification génique avec le temps avec l'ajout de fluorochrome (SYBR par exemple) qui se fixe et "brille" uniquement sur ADN double brin.
Mais dites-moi si je ne dis pas une connerie: "briller" = désexciter après l'excitation par le laser?
Et dans les grandes lignes: comment se fait-il que les SYBR se fixent uniquement sur ADN double-brin? (j'ai beau chercher sur Web, mais je n'ai pas trouvé de réponse... du moins compréhensible. ( >_<; ) Haha...

Merci d'avance!