bactériologie alimentaire

[zimzum18]

Bonjour, j'ai un dm de micro à faire, mais je ne trouve pas les réponses à toutes les questions.

Deux milieux de culture A et B sont utilisés (en angleterre) pour réaliser des tests de contamination fécale lors d'une analyse par filtration d'une eau destinée à l'alimentation humaine. Leur composition est la suivant :

Milieu A
hydrolysat trypsique de caséine 3,7g
peptone 3,7g
tryptose 7,5g
extrait de levure 1,2g
KH2PO4 3,3g
K2HPO4 1g
lactose 9,4g
NaCl 3,7g
desoxycholate de sodium 0,1g
sodium dodecyl sulfate 0.05g
sulfite de sodium 1.5g
fuchsine basique 0.8g
agar 15g

Milieu B
tryptone 5g
extrait de levure 5g
glucose 5g
azide de sodium 0.4g
bleu de méthylène 10mg
TTC 40mg
agar 15g

-Quelles sont les flores bactiériennes recherchées avec ce milieu?
Je dirais les coliformes pour le milieu A car il y a du lactose et du desoxycholate de sodium
Et les Enterocoque pour le milieu B

-Un changement de pH est il nécessaire pour caractériser les colonies???

-Quel sera l'aspect des colonies recherchées? Justifier votre réponse.

-A quelle température incuberiez vous ces milieux?

37°C

Merci de m'aider pour cette exercice.

[zimzum18]

aidez moi svp, dites moi au moins si c'est bien des milieux séléctifs des coliformes et des enterocoque

[s-24]

salut,
je crois bien que le mileu B est pour détecter les coliformes le TTC qui montre le pouvoir réducteur des bactéries et pour plus d'info voici 2 lien
http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biot...o/milieux.html
http://fr.wikipedia.org/wiki/Milieux_de_culture_

[MAJOR]

En ce qui concerne le milieux B, il s'agit du milieu ttc pour le denombrement des coliformes, il est utilisé en general apres filtration sur membrane d'un volume d'eau a analyser.

Il n'y a pas besoin d'un changement de ph pour ce milieu, car on etudie la reduction du ttc, une colonie violette aura reduit le ttc, une colonie jaune non, un autre examen permet de deduire la fermentation du lactose, un halo jaune autour de la colonie traduit cette fermentation du lactose, halo bleu si il n'y a pas fermentation. Ce milieu doit etre incubé a 44°c de 16 a 24h.

En gros avec ces milieux tu recherche les coliformes fecaux, et te permet d'en faire un denombrement en fonction du nombre de colonie jaunes a halo sur le milieu B.

Je vais faire des recherches sur le milieux A pour essayer de t'aider.

[MAJOR]

J'ai trouvé un milieux utilisé en France qui se rapproche beaucoup du milieux A.

Il s'agit de la gelose lactosé au desoxycholate : DL
peptone 10g
lactose 10g
citrate de sodium 1g
Dl 1g
rouge neutre 0.03
chlorure de sodium 5
hydrogenophosphate de potassium 2
Agar 15
ph : 7.3
24h a 30°C

Utilisé pour la recherche de coliformes, necessite un changement de ph pour differencier les colonies, les colonies doivent faire plus de 0.5mm de diametre pour etre prises en compte.
colonies rouge/rose lactose +
colonies incolores latose -
Milieu utiliser pour le denombrement des coliformes. On choisit les resultat comprenant entre 15 et 150 colonies.

[zimzum18]

Pour le milieu B, j'aurai jamais dit que c'est pour des caoliformes, d'habitude il faut du lactose dans les milieux de cultures pour les entérobactériaceae, comme c'est un critére d'identifications.

Et pour le temps d'incubation, c'est 30 ou 44 °C suivant ce qu'on cherche? (coliformes totaux ou thermotolérants)

[zimzum18]

le milieu B ressemble plutot à celui là : http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biot...re/SLANETZ.htm

[zimzum18]

vous en pensez quoi?

[zimzum18]

svp aidez moi

[M@ster Diddi]

Salut

tout d'abord bonne année

Ensuite pour répondre à ta question concernant la température d'incubation. Il y a deux possibilité :
- recherche de coliformes totaux : 30 à 37°C (généralement 37°C)
- recherche de coliformes thermotolérants : 44°C

J'espère que j'ai pu t'aider
bon courage

[M@ster Diddi]

Salut

tout d'abord bonne année

Ensuite pour répondre à ta question concernant la température d'incubation. Il y a deux possibilité :
- recherche de coliformes totaux : 30 à 37°C (généralement 37°C)
- recherche de coliformes thermotolérants : 44°C

J'espère que j'ai pu t'aider
bon courage

[zimzum18]

Salut

tout d'abord bonne année

Ensuite pour répondre à ta question concernant la température d'incubation. Il y a deux possibilité :
- recherche de coliformes totaux : 30 à 37°C (généralement 37°C)
- recherche de coliformes thermotolérants : 44°C

J'espère que j'ai pu t'aider
bon courage

Pour le milieu A?
Mais le milieu B c'est pour les coliformes ou entérocoques?

[M@ster Diddi]

Ma reponse portait sur le milieu A pour le milieu B jepenherai plus sur Enterocoque mais de là à le certifier à 100% pas sur

[zimzum18]

j'ai encore quelques petites questions

a quoi sert l'hydrolysat trypsique de caséine? c'est un facteur de croissance?

le KH2PO4, le K2HPO4,le sodium dodecyl sulfate, le TTC et l'azide de sodium??

merci

[M@ster Diddi]

j'ai encore quelques petites questions

a quoi sert l'hydrolysat trypsique de caséine? c'est un facteur de croissance?

le KH2PO4, le K2HPO4,le sodium dodecyl sulfate, le TTC et l'azide de sodium??

merci

l'hydrolysat trypsique est en effet un apport de facteurs de croissances (plus précisément d'acides aminés) l
e KH2PO4 et le K2HPO4 soit source phosphate potassium soit pour maintenir le pH du milieu
SDS : je sais pas (en bio mol réduction des ponts disulfures)
le TTC : révélateur
l'azide de sodium : inhibiteur