Fabrication d'une puce à ADN

[Didie13]

Bonjour tout le monde!

Ma question est la suivante: Comment fabrique t'on une puce à ADN? (en partant de l'ARNm)

Merci d'avance
Didie13

[mantOs]

Les puces à ADN permettent d'étudier de façon globale et simultanément l'expression de plusieurs gènes.
Cela offre des donnés qualitatives ( quels sont les genes exprimés dans telle situation ) et quantitatifs (à quel niveau sont ils exprimés) .

On dispose ainsi sur support solide l'ADN correspondant aux gènes qu'on veut étudier dans des puits.

Ensuite à partir des ARN exprimés dans un échantillons biologique on réalise à partir de ce pool des ADNc qui nous serviront de sonde.

Ensuite on hybride ces sondes avec le support solide et on detecte les spots allumés ( gènes qui se sont exprimés ) leur intensité dépends de la quantité d'ARNm présent dans l'échantillon.

Cordialement
Paul

[Didie13]

Merci d'avoir pris le temps de répondre!

Ensuite à partir des ARN exprimés dans un échantillons biologique on réalise à partir de ce pool des ADNc qui nous serviront de sonde.

Ces ADNc on peut les prendre tel quel et les amplifier par PCR?

[mantOs]

Non pas d'amplification car tu veux justement quantifier ton expression par l'intensité de révélation qui sera fonction du nombre d'ARNm présent dans ton échantillon

[Didie13]

Ah oui! exact! Encore merci