Dosage des protéines???

[franck8520]

bonsoir.

....est ce que quelqu'un pourrait me dire les différentes technique qui existe
pour dosé une protéine isolé et plutot de petite taille

merci d'avance
bonne soirée
.

[BioCell]

bonsoir,

à première vue 2 idées me viennent: dosage BCA si la protéine est pure et ELISA si on dispose d'une gamme étalon et des anticorps adéquats. Il y en a surement d'autres...
Bonne nuit

[Morphine]

Bonjour,
si tu es certain de la purété de ta protéine et que tu connais sa séquence, tu peux aussi déterminer la concentration de ta protéine en faisant son spectre d'absorbance 220nm-350 nm sur un spectro.
Connaissant le coefficient d'absorption molaire (si tu ne le connais pas, suffit juste de taper la séquence de ta protéine dans un logiciel accessible sur le net tel "protein calculator"), tu peux facilement déterminer la concentration.
C'a peut aussi de donner une idée de l'aggrégation éventuelle de ta protéine en regardant l'absorbance à 350 nm.
A faire contre le tampon dans lequel est stockée ta protéine, bien sur.

Je ne suis pas certains que ce soit moins précis que les dosages colorimétriques qui nécessitent des calibrations par gamme étalon(BCA, bradford et compagnie). Et c'est beaucoup plus rapide...

Morphine

[wajdouch]

bonsoir.

....est ce que quelqu'un pourrait me dire les différentes technique qui existe
pour dosé une protéine isolé et plutot de petite taille

merci d'avance
bonne soirée
.

tu oeut faire l'extraction par le protocole de Nasri2007 puis le dosage par la méthode de Bradford

[nOnO18GYM]

la methode du biuret qui est bien aussi !

[nOnO18GYM]

ou la CCM (chromatographie sur couche mince ) pour savoir les composants de ta proteine