Cellules de Malassey

[invite16b6b21b]

bonjour à tous,
voila je suis en train de réviser des annales de biologie cellulaire j'ai calculée la concentration cellulaire grâce à une cellules de malassey
2 000 000 cellules/ml puis on me demande ceci:

Vous allez réaliser plusieurs ensemencements dans une boîte de culture 6 puits. En fait, vous
souhaitez ensemencer des puits à l'aide de 2 ml de solutions de cellules à 100.000 ; 70.000 ; 30.000 ;
20.000 et 7.500 cellules/ml.
Vous devez donc préparer des tubes de cellules (volume final compris entre 7 et 10 ml) à concentrations souhaitées en faisant des dilutions en cascade à partir de la culture.

j'ai trop de mal avec les dilutions quelqu'un peut il m'expliquer comment faire?
merci
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[invite02cefc91]

Je vais te faire la 1ere et tu devrais pouvoir faire les autres par toi même :

tu as 2 000 0000 de cellules par ml et dans un 1er temps on te demande de faire une solution à 100 000 cellules par ml dans 2 ml.
Donc en concentration cela te faire 20 fois moins. Donc il te suffit de préparer un tube de 10 ml 20 fois moins concentré. Pour cela tu prends un volume de ta solution mère 20 fois moins important que 10 ml, c'est à dire 0.5 ml et tu complète à 10 ml. Et voila il te suffit de prendre 2 ml pour réaliser le 1er puits à 100 000 cellules par ml.

A partir du tube réalisé, tu fais les solutions suivantes, c'est simple.

Pour 70 000 cellules par ml à partir de 100 000 cellules par ml, il suffit de .....


Allez je te laisse réfléchir la suite

[piwi]

Le principe est bon mais pour grandes dilutions (au delà de 10 fois) on préfère les dilutions en cascade.
Dilution 1/2 puis dilution 1/10.

on prépare deux tubes:
1 tube avec 1 ml de milieu (A)
1 tube avec 10 ml de milieu (B)
Prélevons 1 ml de cellules que l'on dilue dans A Puis on reprend 1 ml de A (10⁶ C/mlque l'on dilue dans (B) (10⁵ C/ml)

Pour le reste le principe est le même. (Tu peux réutiliser les tubes que tu viens de préparer)


Cordialement,
piwi

[invite16b6b21b]

Merci pour vos réponses,
donc si j'ai bien compris pour avoir 70 000 cellules je pars du tube contenant 100 000 cellules
100 000 -> 70 000
10 ml -> 7 ml à prélever (facteur de dilution =1,43)

pour avoir 30 000 cellules
70 000 -> 30 000
7 ml -> 3 ml à prélever (facteur de dilution= 2,33) mon problème c'est que le volume (3ml) n'est pas compris entre 10 et 7 ml comme on le demande dans l'énoncé ?

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite16b6b21b]

[QUOTE=tayoh;1681197]Merci pour vos réponses,
donc si j'ai bien compris pour avoir 70 000 cellules je pars du tube contenant 100 000 cellules
100 000 -> 70 000
10 ml -> 7 ml à prélever complète à 10 ml

pour avoir 30 000 cellules
70 000 -> 30 000
10 ml -> 4,3 ml à prélever complète à 10 ml je crois que je viens de comprendre faites pas attention à l'autre message qui voulais rien dire