ultracentrifugation et cellules!
bonjour,
je voudrais réaliser des ultracentrifugations différentielles afin de déterminer la localisation d'une protéine spécifique qui m'intéresse. mais au lieu de le faire sur tissu, j'aimerais le faire à partir de culture de HEK. Auriez vous une idée du nombre de cellules dont j'ai besoin pour avoir au final une quantité de proteine suffisante pour faire des western ?
merci beaucoup
Bonjour,
Tout dépend du compartiment cellulaire que tu veux isoler, de la représentation de ta protéine dans ce compartiment....Donc c'est par l'expérience que tu sauras quelle quantité de cellule te permet d'avoir une bande convenable en western. Pour commencer tu peux essayer plusieurs conditions où tu auras mis un nombre croissant de cellules. Ainsi tu sauras où te placer en nombre de cellules pour que les manips suivantes marchent.
Greg
