Bonjour,
Je voudrais connaître le rôle précis des composants du tampon d'extraction que j'utilise, the Edward Buffer, pour extraire l'ADN de pétunia.
J'ai fait quelques hypothèses, qu'en pensez-vous ?
- SDS (dodécylsulfate de sodium) : détergent qui dissocie les membranes lipidiques
- Tris : maintien le pH entre 6.5 et 9.7 (pourquoi faire ? L'ADN ainsi est préservé ?)
- EDTA : inhibiteur des métallo-enzymes comme les nucléases qui dégradent l’ADN. Il séquestre les ions magnésium Mg2+ et bloque ainsi l'activité de nombreuses nucléases qui sont dépendantes de cet ion.
- NaCl 0,5M : responsable de la plasmolyse des cellules qui libèrent leur contenu qui n’est plus retenu par la paroi pectocellulosique (en sachant qu'on a déjà broyé mécaniquement les fragments) ou pour que le SDS soit soluble dans l’alcool ?
Merci
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