Bonjour à tous!
Voilà, mon problème et le suivant : je veux vérifier l'influence d'une protéine sur l'angiogenèse.
Pour ce faire j'ai transfecté des cellules endothéliales aortiques humaines (lipofectamine) pendant 48h. Puits je les ai trypsinées et réparties en plaque 96 puits contenant chacun 50µl de matrigel (solidifié par incubation préalable 1h à 37°C), à raison de 50 000 cellules/puits pour 150µl de MCDB+sérum10%.
J'ai placé le tout sous video microscope et j'ai pris une image toute les 20min pendant 16h (l'idée était de trouver le temps x optimal pour avoir juste à faire une prise de vue à t0 et tx pour les expériences suivantes)
Chaque condition a été réalisées en duplicats et j'ai pris deux prises de vue pour chaque duplicat (sauf le dernier)
Voici les videos obtenues à partir de cette expérience :
https://picasaweb.google.com/1007496...eat=directlink
Comme toute première tentative qui se respecte, ça ne s'est pas passé comme prévu... Au delà du fait que les cellules ne font que peu de tubules, j'ai l'impression qu'elles s'agglutinent beaucoup plus que sur les images que j'ai trouvé dans la littérature.
Quelqu'un aurait il une idée d'où pourrait provenir le problème?
Merci d'avance, pour votre aide!
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