Nombre de cellules

[CultureCell]

Bonjour,

J'aimerai pouvoir savoir précisément le nombre de cellules présentes au total dans un puit (plaque 6 puits ou 48 puits)
On peut utiliser des marquages de noyaux (DAPI) puis compter le nombre de spot lumineux, mais quelles sont les autres alternatives?

Mes cellules sont adhérentes et ne doivent pas etre décollées dans la mesure du possible
Qu'il y ait fixation préalable ou non avant le comptage m'importe peu

PS: Précisément, c'est a dire ne pas avoir d'estimation moyenne type malassez ou autre
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[biseibutsu]

Bonjour,

A part les méthodes de microscopie, je ne vois pas... Surtout s'il ne faut pas les décoller (sinon, cela aurait été FACS...).
Certains commerciaux proposent des microscopes avec des logiciels d'analyse pour remplir cette fonction. De mémoire, tu peux faire une coloration au Tryptan Blue (les cellules vivantes excluent le bleu) ou même pas de coloration du tout (dans ton cas, sur cellules fixées par exemple).
J'avais essayé un modèle de Zeiss, qui comptait précisément les cellules (à part au niveau des bords en visible, où il avait tendance à faire des erreurs - mais cela a du évoluer depuis le temps).

Il peut également avoir des logiciels (ou des macro sur Metamorph) qui doivent permettre de faire cela. Le mieux, c'est de contacter directement les fabricants de microscope, ils ont généralement des services pour l'imagerie.