His-tag purification

[mailaure]

Bonjour,

j'aimerais comprendre le principe de la purification His-Tag.
Pourquoi une protéine qui a une séquence His-tag s'accroche sur des colonnes Ni et pourquoi l'imidazole décroche la protéine (je suppose qu'il a une plus forte affinité pour le Ni mais leur affinité pour le métal est du à la formation de quel composé?)

Merci!
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[vpharmaco]

La liaison se fait via la formation d'un complexe de coordination avec le Nickel. Cf ce schéma : http://www.gentoprice.com/Ni-His-Reaction.gif

[mailaure]

Merci!!!!