Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

[oduespstra]

Bonjour,

Je me retouve face d'un exercice dont je ne suis pas sûr si je l'ai bien résolu.
L'énoncé est le suivant: Une solution renfermant les protéines suivantes, albumine (pI = 4,6) , uréase (pI=5,1) et myoglobine (pI=7,5) est déposée sur une colonne d'échangeuse d'anions à pH = 6,5. La colonne est lavée avec un tampon pH 6,5 renfermant des quantités croissantes de NaCl. Dans quel ordre les protéines sortiront de la colonne?
Ma réflexion: la myoglobine est la seule à être chargée +, donc elle n'est pas retenue. Les deux autres vont être retenues car chargées -, mais forcément avec des temps de rétention différents. Est-ce que l'albumine restera plus longtemps retenue car son pI est encore plus en-dessous du pH 6,5 que celui de l'uréase? Au début je me suis dit que peut-être ça a avoir avec la solubilité des protéines (salting-out), mais on n'a pas vu de moyen pour connaître à partir du pI l'ordre de précipitation de peptides en solution saline croissante?

Merci pour toute réponse,

oduespstra.
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[noir_ecaille]

Le pI (pH isoélectrique) est le pH où la protéine est en principe de charge globalement neutre. C'est à dire là où elle est le moins chargée.

Qu'en déduisez-vous ?

Pour un pH plus alcalin (insaturation protonique des fonctions acides et basiques), elle sera davantage chargée :

 Cliquez pour afficher

négativement

Pour un pH plus acide (saturation protonique des fonctions acides et basiques), elle sera davantage chargée :

 Cliquez pour afficher

positivement

En espérant que ça vous aide

[oduespstra]

Bonsoir,

Oui ça m'aide beaucoup!
Super, merci

Cordialement

[Marilie]

Bonsoir,
Moi je n'ai pas très bien compris :/

[A voir en vidéo sur Futura]

[noir_ecaille]

Moi je n'ai pas très bien compris :/

Commencez par expliquer ce que vous penser comprendre, puis on reprendra là où ça coince.