Extraction ARN - Différents Time points

[Chloethebiologist]

Bonjour à tous,

J'avais une question qui me turlupine depuis quelques temps.
J'ai tendance à être un peu trop rigoureuse et parfois cela peut être inutile. Faut reconnaître ses torts lol
Je dois faire des extractions d'ARN à différents time points espacés de quelques semaines. Le but étant de regarder l'évolution de l'expression d'un gène au cours du temps (RT-qPCR)
En temps normal, j'aurai congelé mes ARN dans le tampon de lyse et les aurait extraits tous le même jour.

Sauf que pour des raisons techniques, j'aimerai faire les extractions à chaque time points avec le même protocole d'extraction, bien sûr.
Je précise que je les doserai au Nanodrop, mesurerai le RIN à chaque fois et congèlerai à -80°C. En sachant que, je ferai la RT-qPCR en même temps pour tous les échantillons d'ARN.

Qu'en pensez vous?

Merci d'avance,

Clo
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[sebastien_cha]

Bonjour,
Pas de soucis d'extraire tes ARN et de congeler ensuite au -80°C pour tes différents time points. J'éviterai même de les congeler dans le tampon de lyse.
Mais a ta place je testerai les RIN après décongélation, avant ta RT.

Seb

[Flyingbike]

Ok aussi: extraction au fur et à mesure et rt/ pcr en même temps
Pour le tampon de lyse bof, c'est quoi comme tissu ?