Problème de PCR

[baobabs2009]

Après extraction, je vérifie sur gel d'agarose mes extraits, j'ai de belle bande d'ADN. La PCR avec des amorces chloroplastiques, la plupart sont négatifs. En répétant la PCR, les mêmes individus sont toujours positifs.
Je voudrais avoir des explications.
Merci à vous.

[Yoyo]

Salut a toi

désolé mais je n'ai rien compris a ton probleme. essaye d'etre moins synthetique et rappelle toi qu'on n'est pas derriere ton épaule pour voir ce que tu fais! ca nous aidera a t'aider.

Yoyo

[baobabs2009]

Désolé, je vais être le plus claire possible. Sur gel d'agarose, j'ai des bandes d'ADN mais je n'arrive pas à amplifier la majorité de mes extraits avec dilution (Tests PCR négatifs). En répétant la PCR, ce sont les mêmes qui sont amplifier.
Merci pour vos réponses.

[piwi]

Moi aussi j'ai vraiment de la peine à comprendre ce que vous dites.
Vous avez des extraits que vous testez pour un gène de chloroplaste et ce sont toujours les mêmes qui sortent positifs. Ce que vous souhaiteriez savoir c'est pourquoi certains sont toujours négatifs?
C'est cela?

[baobabs2009]

Exact, je veux savoir pour quel raison je ne peut pas amplifier malgré que j'ai des bandes d'ADN sur gel d'agarose

[MaliciaR]

Mais si tu as des bandes sur gel, c'est que la PCR que tu viens de migrer a marché, non?

Je ne comprends rien à la chose en fait...

[baobabs2009]

j'ai des bandes au test ADN mais pas de bande après PCR

[bapio]

Bonjour;
tu dis que tu as vérifié la qualité de l'extraction, ça j'ai compri!

j'aimerai quelques détailles:

quand tu dits "positif" 'c'est par rapport à la taille des bandes observées ou bien c'est parce qu'il ya des bande?

quand tu dits "négatif" est ce parce qu'il n'y a pas de bandes du tout? ou bien parce que les tailles sont différente de celle attendues?

Merci

[bapio]

tu pourrais si possible attacher une photo de ton gel en revelation, pour que je puisse regarder.