Influence du pH sur la catalyse enzymatique

[MissCaissy]

Bonjour, je suis en 1èreS, et j'ai un petit soucis sur un point concernant les enzymes.
En fait, je dois proposez un protocole expérimental simple afin de tester l'effet des variation de pH sur la synthèse d'amidon.
Quelqu'un pourrait-il m'aider svp?
Merci d'avance pour l'aide

[Flyingbike]

deja il faut que tu définisse quelle réaction tu veux étudier : la synthese d'amidon. Tu peux deja rechercher les conditions nécessaires à cette réaction (enzyme, substrat, coenzymes.....), puis comment évaluer la vitesse de cette réaction (par exemple en dosant l'apparition du produit en fonction du temps)


Ensuite adapte ton protocole dans une situation ou tu peux faire varier le pH : cherche comment contrôler le ph d'une réaction, comment le modifier, comment le mesurer, etc...

[MissCaissy]

Alors l'enzyme serait l'amylase salivaire et le substrat l'amidon.
Je pense qu'on pourrait utilisé un tube à essai, mettre quelque mL de substrat, ajouté l'amylase et vérifier tout de suite au temps 0 le pH de la solution avec du papier pH. Ensuite toute les 3 minutes, tester le pH à nouveau.
Penses-tu que c'est une bonne expérience en gros?

[Flyingbike]

non !

on ne te demande pas d'étudier la variation du pH au cours de la réaction, mais l'influence du pH sur la réaction. le pH est donc un paramètre que tu contrôles !

[MissCaissy]

Ah oui ! Mais comment faut-il faire pour faire varier le pH?

[Flyingbike]

le mieux pour qu'il reste constant et contrôlé c'est d'utiliser un milieu tamponné (je te laisse faire la recherche). N'oublie pas dans ce genre de protocole que tu ne fais varier qu'un paramètre a la fois, tous les autres doivent être fixés (quantité de substrat, d'enzyme, temps, ...)

[piwi]

Il suffit de faire plusieurs réactions en parallèle en ajoutant plus ou moins de soude ou de HCL (ou des acides et bases faibles, ça semble plus prudent) dans le milieu réactionnel. Ensuite il suffit de tester l'effet de l'amylase sur l'amidon.

Vous connaissez la liqueur de Fehling? Si ce n'est pas le cas, vous feriez bien de vous rencarder dessus, ça devrait vous aider

Cordialement,
piwi

[MissCaissy]

J'ai beau cherché, je n'arrive pas à comprendre, j'ai du loupé quelque chose.
Pour répondre à ta question Piwi je connais la liqueur de Fehling. Elle est utilisé pour mettre en évidence certains sucres. Mais je ne vois pas son utilité en fait.
Je suis désolé de vous embêter avec ça.. =/

[piwi]

La question est de connaitre l'influence du pH sur l'activité de l'amylase. Premièrement, il faut se demander quelle est la fonction de l'amylase? Comment détecter le produit de réaction?

Une fois que vous avez fait cela vous voulez voir l'influence du pH sur l'efficacité de l'amylase à produire son action. Pour cela vous prenez plusieurs tubes, vous mettez votre milieu réactionnel avec dans chacun d'eux un pH différent.
ex: 4; 4,5; 5; 5,5 .... etc.
Au bout d'un temps T vous dosez le produit de réaction dans chacun des tubes.

Cordialement,
piwi

[MissCaissy]

Protocole:
- verser dans les 4 tubes à essais du filtrat de pomme de terre et du glucose 1 phosphate
- dans un premier tube, rajouter de l'eau distillée
- dans un 2° de l'acide chlorhydrique dilué
- dans un 3° de l'acide un peu moins dilué
- et dans un dernier de l'acide concentré
- Rajouter qque gouttes de soude dans chaque tube et les mettre dans le bain thermostatique
- Enfin tester avec l'eau iodée et du papier pH

Nan?

[piwi]

Pourquoi ajouter de la soude dans chacun des tubes?

Votre protocole ne dit pas ce que vous souhaitez tester et ce que vous pensez obtenir.

Cordialement,
piwi

[MissCaissy]

Vous avez raison. Merci beaucoup pour votre aide, j'ai trouvé la solution.