Plan focal et microscopie biphotonique

[invitef015dac6]

Bonjour,

Je suis biologiste et je suis amené à utiliser beaucoup de microscopie (PALM, 2-photons, FRET,...). Aussi, je me pose certaines questions concernant la microscopie 2-photons:
Un des principe de cette technique est que seuls les fluorophores au plan focal absorbent 2 photons. Ou du moins, la probabilité d'en absorber 2 est plus grande ceci due au fait que l'intensité du laser est plus forte à ce point.
Mais pourquoi l'intensité de la longueur d'onde émise par le laser est plus grande à ce plan??

Merci par avance pour votre aide et à bientôt,

Poteyuh
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[Chip]

Je ne suis pas microscopiste, mais je dirais que c'est tout simplement parce que le laser pulsé est focalisé dans ce plan. La section du rayon laser augmente rapidement hors de ce plan (en gros, en z² lorsqu'on est suffisamment loin du plan de focalisation, c'est à dire en gros hors de la zone de Rayleigh), et par conséquent la densité énergétique de rayonnement décroît. Et avec elle la probabilité d'absorber deux photons (qui décroît encore plus vite, ça doit être en 1/z^4 a priori).