Bonjour,

Je fais également des western blot et j'ai le même problème que toi. je resuspend mes protéines directement dans le tampon de charge donc je ne peux pas quantifier la quantité de protéines que je dépose sur gel.

Par contre, pour quantifier j'utilise trois façons différentes :
tu peux utiliser les bandes aspécifiques présente sur ma membrane (s'il y en a),
tu peux couper ton gel en deux. Une partie de ton gel va être colorée au bleu de Coomassie et l'autre partie va être transférée sur membrane. tu peux grâce à la coloration au bleu déterminer si tu as déposé une quantité équivalente de protéines sur gel.
L'autre solution est d'hybrider ta membrane avec un second anticorps : qui va reconnaitre une protéine témoin (style l'actine si bien sur la taille de ta protéine témoin n'est pas la même que celle de ta protéine d'intérêt)!

Voilà, j'espère avoir pu t'aider
A bientôt

Lilie