absorbance et concentration

[MagicFalco]

bonsoir,

je bloque actuellement sur un exercice de biochimie dont voici l'énoncé

A 2 ml d'une solution de glucose, on ajoute 1 ml d'une solution qui contient en excès de l'ATP, du NADP+, de l'hexokinase et de la glucose-6-phosphate- déshydrogénase (G6PDH). L'absorbance finale, mesurée à 340 nm avec une cuve de 1 cm de trajet optique est de 0,91.

Calculer la concentration en glucose de la solution originale sachant que E molaire du NADPH à 340 nm est de 6220 M/cm.

pour ma part, je répondrai de la facon suivante

le G6PDH va convertir le glucose en un autre produit et lors de cette conversion la libération de H+ induit la réduction en NADP+ en NADPH. De ce fait, la quantité de NADPH produit est égale à la quantité de glucose présent intitiallement ( en effet tout le glucose est transformé vu que le G6PDH a été introduit en excès)

On a donc [NADPH] = [ glucose]

A l'aide des valeurs fournises on peut calculer [NADPH] et donc en déduire la concentration en glucose.

est-ce correct? merci de me le confirmer
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[invite807a92f5]

Salut,
Je suis pas trop d'accord, d'après moi :
le glucose -> (par l'hexokinase) G6P
G6P + NADP+ -> (par la G6PDH) 6P gluconolactone + NADPH,H+
6P gluconalactone ->(par lactonase) 6P gluconate
6P gluconate + NADP+ -> (par la 6P gluconate DH) Ribulose 5P + NADPH,H+.
(= cycle des pentoses phosphates)
Donc pour 1 molecule de glucose dégradé, on a 2 molécules de NADPH,H+

[invite807a92f5]

Donc :
[NADPH,H+] = 0,91/(6220x1) = 1,46 x 10^-4M
d'où [glucose] = [NADPH,H+]/2 = 7,31 x 10^-5M

qu'est-ce que t'en pense?

[invite1705737a]

Salut,
Je suis pas trop d'accord, d'après moi :
le glucose -> (par l'hexokinase) G6P
G6P + NADP+ -> (par la G6PDH) 6P gluconolactone + NADPH,H+
6P gluconalactone ->(par lactonase) 6P gluconate
6P gluconate + NADP+ -> (par la 6P gluconate DH) Ribulose 5P + NADPH,H+.
(= cycle des pentoses phosphates)
Donc pour 1 molecule de glucose dégradé, on a 2 molécules de NADPH,H+

Il n'y a pas de lactonase ni de 6P-gluconate-deshydrogénase dans le réactif, donc la réaction s'arrête après la formation du premier NADPH.

Donc :
[NADPH,H+] = 0,91/(6220x1) = 1,46 x 10^-4M
d'où [glucose] = [NADPH,H+]/2 = 7,31 x 10^-5M

qu'est-ce que t'en pense?

Il faut tenir compte des volumes et de la dilution qu'ils entraînent...

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite807a92f5]

Je crois que j'ai mal lu l'énoncé , en fait on a bien [glu]=[NADPH]

Donc [NADPH]=1,46x10^-4M

Puis en prenant compte les volumes, on multiplie par 2 :
[glu] = 2,92x10^-4M

[invite807a92f5]

Non , on multiplie par 3/2 parcequ'on a 3ml de volume final, et 2ml de volume initial (de glucose) (2,19x10^-4).