dénombrement des bactéries

[invitea98d176a]

bonjours tout le monde
j'ai une question et j'aimerai bien que vous m'aidez:
quels sont les techniques utilisés pour la dénombrement des bactéries en milie:u liquide et solide
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[Yoyo]

salut

en liquide tu peux prendre la DO et faire la correspondancce avec le nombre de cellules. Sinon tu comptes les cellules avec la cellule de type malassey. Enfin, la derniere solution est de prélever un aliquote, de fixer les cellules, les colorer puis de les compter.

En solide, tu fais des dilutions en serie que tu etales sur des milieux de croissance et en denombrant les colonies et connaissant la dilution tu en deduis la quantité de bactéries initialement présente.

Yoyo

[invitea98d176a]

salut

en liquide tu peux prendre la DO et faire la correspondancce avec le nombre de cellules. Sinon tu comptes les cellules avec la cellule de type malassey. Enfin, la derniere solution est de prélever un aliquote, de fixer les cellules, les colorer puis de les compter.

En solide, tu fais des dilutions en serie que tu etales sur des milieux de croissance et en denombrant les colonies et connaissant la dilution tu en deduis la quantité de bactéries initialement présente.

Yoyo

merci pour votre réponse

[invite8d2e42a2]

salut!!

tu peux aussi denombrer en milieu liquide par la méthode statistique du MPN(nombre le plus probable) a l'aide de la table de cochran ou mac grady!!

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite7f76ab4c]

Dénombrement aprés culture:
1/ Sur un milieu solide: après une dilution décimale
- on prélève 1 ml de la solution mère et on l'introduit dans un tube à essai contenant 9ml d'eau physiologique ( 1ml+ 9 ml= la première dilution 10^-1)
- on prélève un autre 1 ml de la dilution 10-1 et on l'introduit dans une 2ème tube ( dilution 10^-2)
- on refait l'opération jusqu'aux dilutions voulues.
- on prélève 0.1ml de la dilution 10^-1 et on le met dans une boite de petri ( au centre) et on l'étale ( mème technique pour les autres dilutions)
- incubation à 37°C pendant 24h
- on compte les colonies sur chaque boite, le nombre de colonies qui est de 15-300 colonies est acceptable, sinon les boites ne seront pas tenues en compte
Et voila la loi de numéro des bactéries:
la somme des boites 1 Vsm
N = _________________ * _____ * _______
n1 + ( 0.1 * n2) d * V Vrp
N= nombre de bactéries/g ou par litre
n1= nombre de boites de la dilution la plus faibe ( la première dilution)
n2= nombre de boites de la seconde dilution
d= facteur de dilution (la plus faible)
V= volume de la prise de l'essai
Vsm= volume de la solution mère
Vpr= volume de prélèvement du produit

2/ Sur un milieu liquide:
Elle est utilisée lorsque les bactéries se cultivent difficilement sur un milieu gélosé. La présence des germe se traduit par un trouble.
La loi de NPP ( nombre plus probable)

1
Vsm= NPP * _____
d * V

Comment obtenir le NPP:
je vous donne un exemple:
si on a 3 dilution ( 10^-1, 10^-2, 10^-3)
la dilution 10^-1 présente 2 tube + ( trouble)
la dilution 10^-2 présente 2 tubes + ( trouble)
la dilution 10^-3 présente 3 tubes + ( trouble)
donc, le NPP = 123 ( on débute par la dilution la plus faible: 10-1) et on utilise le tableau qui lui convient.

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