Culture in vitro

[invited1061610]

Dans un milieu de culture in vitro de végétaux, à quoi servent le Na2EDTA et le FeSO4? Sont-ils nécessaires à la croissance des plantes in vivo?
Merci
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[invite03b8166b]

Dans un milieu de culture in vitro de végétaux, à quoi servent le Na2EDTA et le FeSO4? Sont-ils nécessaires à la croissance des plantes in vivo?
Merci

Salut
il s'agit du Fer,element indispensable a la plante qu'on lui apporte sous forme de chelate a une concentration de 10 a 30mg/l

[invite89fc9b3f]

Voila je suis nouvelle sur le forum et je n ai pas su comment crée un nouveau sujet sur la culture in vitro enfin pour posé une question:
moi je suis en 3eme année license physiologie et genetique végetal et on etudie le modul de biotechnologie ou on a fait la culture in vitro
mais ce que j aimerai avoir c'est es étapes de l asepsie et la préparation du milieu dans des condition favorable
merci d avence

[nowell]

Bonjour, et bienvenue sur les forums futura sciences.

Pour ce qui est de l'asepsie, il vous faut vous placer sous hotte à flux laminaire, ce qui suffit. Une flamme de bunsen à moins de 30 cm de tout ce que vous manipulez. Conservez à portée un bécher d'éthanol, pince de précision (type brucelles) qui trempe dedans.
Dès que vous vous en servez sortez la pince et tout autre instrument susceptible d'être en contact avec le matériel biologique, et passez le rapidement au dessus de la flamme pour l'enflammer et le stérilisé.

Vous pouvez ensuite manipuler à proximité de la flamme. Si vous utilisez des erlen ou des tubes à essai pour les cultures, passez également l'encolure à la flamme quelques secondes.


Pour ce qui est de la préparation en soi du matériel biologique:
Si vous utilisez des tiges de végétaux ou autre, il vous faudra d'abord peler très finement la surface du végétal. Puis plongez le successivement dans 2 bains : ethanol absolu ou à 90%, puis 5 minutes dans l'eau de javel jusqu'à ce que la surface apparaisse blanchâtre.
Une fois que vous sortirez le métériel végétal du bain de javel, il sera considéré comme stérile, traitez le comme tel.


Il reste encore le milieu. Alors là tout dépend de ce que vous désirer faire de votre matériel végétal, en donner un cal, une embryogénèse somatique, zygotiques...
Il existe une multitude de milieux à acheter, notamment les milieux solides MSd40 (Murashige et Skoog), MDd20, Lite... ou des milieux liquides. Dans tous les cas vous pouvez les supplémenter avec ce que vous jugerez utile.
Une fois le milieu coulé, il n'y à qu'à le passer à l'autoclave.

Vous pouvez alors passez sous la hotte avec votre milieu, votre matériel stérile et procéder.
Une fois fini, faite un tour avec vos préparations dans l'incubateur.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite89fc9b3f]

merci beaucoup pour votre explication et pour votre aide...grace aux informations que j ai et ce que vous venez de me donner je pourai faire un montage qui expliquera tout ça
nous en TP on a fait la culture de cal sur olea europea (l'olivier)..
merci encore une fois