{Bioch} - Dosage de l'Histidine par HCL

[inviteed869ee5]

Salutations !

J'ai un petit souci pour une préparation de TP de dosage de l'histidine .

On a un 800mg de monochlorhydrate d'histidine monohydraté à dissoudre dans 27 mL d'eau distillée.
On ajoute ensuite un excès d'environ 5,5 mL de NaOH à 2mol.L-1

On dose ensuite à l'HCl 2 mol.L-1 pour obtenir la courbe de dosage.

Et la question qui me fait bloquer c'est "quelle quantité de NaOH a été mise en excès ?"

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Au début, on a de l'His¹⁺, H₂0

Pour calculer la quantité de matière de His, on a :
n=m/M
m = 800mg
M = M_his + M_eau = 110+ 18
110 car on considère une masse moyenne de 110 daltons par aa avec la correspondance en g/mol
n=0,00625 mol
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La soude permet de déprotoner jusqu'à His^-
Il nous faudra pour cela 2 volumes équivalents.

Et voilà le souçi :

Si on a 0,00625 mol d'His+, il faut 0,00625 OH^- pour constituer une équivalence. Il faudra donc le double pour déprotoner l'ensemble.
Soit 0,0125 mol soit encore avec V=n/C =0,00625 L
Donc l'excès de NAOH ne serait pas un excès... Ce serait paradoxal !

La question est où est l'erreur ?

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Je suppose que c'est au niveau de la masse molaire de l'His. En ajoutant directement les masses molaires des atomes, on trouve entre 154 et 157 g/mol. (155 et des poussières sur wiki) ce qui change pas mal de chose dans ce cas...

Et le calcul ferait :
n=(800×10^-3)/(155+18)
n=0,00462 mol

et là il faudrait donc "seulement" 4,6 mL de soude et il y aurait bien un excès.

Est-ce que le second raisonnement est juste ?
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Merci d'avance pour votre (vos) réponse(s)

Eracronis
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[inviteed869ee5]

bonsoir,

personne n'a d'idées ?

[Flyingbike]

si tu n'as que de l'his dans ton tube, il faut prendre en compte la MM de l'histidine et non la masse molaire moyenne d'un aa qu'on utilise plutot pour calculer la MM théorique d'une protéine de x résidus. Ton second raisonnement parait être le bon.

[inviteed869ee5]

Oki, merci pour ta réponse.

En fait, il faut rajouter la masse molaire de l'HCl à celle de la solution d'his+ monohydratée car il faut maintenir l'his dans cet état.


Enfin, bref, je verrais tout ça en détail demain en tp.

Bonne soirée

[A voir en vidéo sur Futura]