Knock In

[darkorrr]

Bonjour,
je suis en prmière année de médecine et notre professeur de Biologie Moléculaire nous a parlé d'une technique pour la transgénèse qui se nomme Knock In, je n'ai pas tres bien compris son fonctionnement ni son but et je voulais savoir si quelqu'un pouvait m'eclairer.
Merci d'avance.

[Edelweiss68]

Bonjour,

Ca ne serait pas Knock out?

[darkorrr]

non justement, c'est une variante de knock out ...

[Edelweiss68]

Dans le knock-in, il s'agit de remplacer un gène par un autre.

Ceci est souvent utilisé pour insérer un gène rapporteur comme par exemple le gène LacZ et étudier où le gène remplacé est censé s'exprimer.

Ou alors, en remplaçant un gène par un autre ayant une structure proche, on peut voir si leurs fonctions sont proches également.

[nowell]

Bonsoir

ON eut en effet pratiquer les techniques de knock in et knock out par une technique que j'affectionne partiulièrement: le Cre / LoxP

CRe = Cyclization recombination par la proteine de fusion LoxP
Cela permet de cycliser l'adn et de le rendre impropre à la lecture. le gène se situant dans le cycle est alors supprimé: c'est le knock out.
Mais on peut également faire un Knock in en cyclisant un codon STOP, permettant ainsi d'ignorer le stop. La protéine est alors à nouveau traduite.

J'ai un schéma sympatoche que vous pouvez exploiter pour mieux comprendre encore.
http://upload.wikimedia.org/wikipedi...experiment.png

cordialement
Nowell

[darkorrr]

merci beaucoup, c'est justement cette technique qui m'interressait