Southern Blot
Bonjour,
Voilà j'ai réalisé un Southern Blot avec un marqueur de taille de 1kb.
Le problème c'est que ce marqueur de taille n'est pas apparue sur la membrane après révélation.
Pourtant il a bien était marque (avec une sonde froide).
Que s'est il passé???
merci d'avance
P.S: Joyeuse Paques à tous
Bonjour,
Eh bien ton transfert ne s'est peut-être pas fait correctement.
L'ADN que tu analysais lui est bien visible sur ta membrane ?
Avec quoi as-tu révélé ton ADN et ton marqueur ? Il y a peut-être un problème à ce niveau aussi ...
Joyeuse Pâques à toi aussi.
Donc oui certain des mais échantillon d'ADN sont très visible!
Le marquage à été fait avec du HPR et la détection se fait avec 1ème de l'H2O2 + Luminol.
voilà merci d'avance!
Bonjour,
Désolé pour la réponse tardive mais je n'ai pas trop le temps de venir sur le forum en ce moment.
Certains ? Donc pas tous ? Tu peux nous montrer ton Southern stp ?Donc oui certain des mais échantillon d'ADN sont très visible!
Tu veux dire HRP pou HorseRadish Peroxidase non ? 1ème ça veut dire quoi ?Le marquage à été fait avec du HPR et la détection se fait avec 1ème de l'H2O2 + Luminol.
Tu fais quoi comme marquage en fait ? Tes sondes possèdent des nucléotides couplés à de la digoxigénine et tu révèles avec un anticorps anti-digoxigénine couplé à la HRP c'est ça ?Pourtant il a bien était marque (avec une sonde froide)
En fait, je ne comprends pas pourquoi tu veux que ton marqueur de taille soit visible vu que ta sonde va s'hybrider uniquement sur l'ADN que tu étudies non ?
