[Biochimie] Méthode de Kjeldahl
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Méthode de Kjeldahl



  1. #1
    invite75e918c6

    Méthode de Kjeldahl


    ------

    Bonjour à tous,

    J'ai un problème à régler et je ne trouve pas le soucis.
    C'est concernant la méthode de Kjeldahl où il n'y a pas de concordance avec les résultats théorique et expérimentale.

    D'abord je vous fait un topo sur cette méthode et ensuite je vous expose mon soucis.
    Tout d'abord, la méthode de Kjeldahl est utilisé pour doser la quantité d'azote organique et ainsi pouvoir doser les protéines d'un échantillon, je le fais via cette appareillage
    http://www.precisionnews.com/articles_images/483.jpg

    Ensuite, il se distingue en 3 étapes : la minéralisation, la distillation et le titrage.
    Je vous met les formules de ces 3 étapes :

    Minéralisation
    2 N organique + H2SO4, H20 (400°C pendant 3h) ---> SO4(NH4)2 + (CO2 + H20) sous forme de gaz (avec la température)

    Distillation
    SO4(NH4)2+ 2NaOH (excès) ---> SO4Na2 + 2NH4OH
    NH4OH ---> NH3 (gaz) + H20, le NH3 est récupéré par distillation par le système d'air frais qu'il fait recondenser les gaz en liquide
    NH3 + H20 ---> NH4OH
    fixation de l'ammoniac sur l'acide borique
    NH4OH + H3BO3 (excès) ---> H2BO3NH4 + H20

    Titrage
    2H2BO3NH4 + H2SO4 ---> 2H3BO3 + SO4(NH4)2
    H2BO3NH4 + HCl ---> H3BO3 + Cl((NH4)

    Raisonnement au titrage

    2NH4OH + H2SO4 ---> 2H20 + (NH4)2SO4
    NH4OH + HCl ---> H20 + (NH4)Cl


    Cependant mon soucis est le suivant,
    Quand je calcul théoriquement la quantité de N organique

    C(N org)= (C(HCl)*V(HCl)*M(N))/m(echantillon)
    je trouve une concentration de 0,6 g pour 100 g de solution.
    Mais quand je le fais expérimentalement, j'ai le double en concentration (1,4 g pour 100 g de solution) et donc j'en ai parlé avec ma prof de biochimie et elle aussi ne trouve pas le problème, on aurait pensé que le soucis est qu'il y ai un facteur 2 qui manque dans les équations (on avait pensé à la première réaction avec 2N ---> SO4(NH4)2 mais quand on fait ça et qu'on réfléchis en équivalent, pour remonter jusqu'au titrage, ça sonne faux... et cela marche si on retire ce facteur à ce N, cependant la réaction serait alors fausse !!!

    Voilà un peu mon soucis, j'en serais entièrement reconnaissant si vous arriviez à règler mon soucis !!


    -----

  2. #2
    invite75e918c6

    Re : Méthode de Kjeldahl

    Pas de réponse?

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