bonjour,
je boss sur un protocole de stimulation d'un récepteur membranaire sur une lignée épithéliale bronchique. Pour faire un suivi du récepteur lors de son internalisation ect, j'ai besoin d'isoler les différents compartiments cellulaires. Pour l'instant j'utilise un proto (Hurst et al. 1990) initiallement conçu pour faire une extraction nuclaire. Donc j'obtiens 2 fractions noyau et cytosol+membrane (pas de conta entre les fractions j'ai vérifié). Je cherche un kit style colonne de filtration qui me permette de purifier le cytosol des membranes. j'ai déja testé un kit de purif qui était censé me donner les trois fractions séparées mais résultats pas probants (conta +++) et je peu difficilement faire de l'utracenti car mes échantillons sont congelés entre temps. voila donc si quelqu'un à un tuyau...
merci d'avance
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