Questions sur clonage

[Biologiste16]

Bonsoir chers internautes; je me pose quelques questions en génie génétique et dont j'espère avoir des réponses
Je me lance :

1/De quoi dépend le choix d'un hôte de clonage qu'il soit procaryote ou eucaryote? est-ce sa capacité d'insérer des fragments longs?

2/Comment peut-on obtenir une forte expression des gènes insérés dans un vecteur de clonage? est ce en insérant plusieurs fragments?

3/A quel niveau se fait la réplication des petits plasmides vue que pour les grands ça se passe au site d'attachement membranaire?

Voilà c'est tout pour le moment, j'attends vos réponses. Merci
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[LXR]

Le forum est francophone, les titres doivent donc être écrits en Français.

LXR pour la modération

[invite6b7817ab]

Bonjour, je vais essayer de repondre a vos questions le plus precisement possible.

1/ le choix de l'hote de clonage depend en partie de la cytotoxicité de la protéine resultant du gène d'interet. Certaine protéine seront toxique pour un procaryote et donc il n'y aura aucune utilité a cloner le gene dans un procaryote.

2/si vous voulez obtenir une forte expression du gène il suffit de mettre un promoteur a forte expression (pCMV (promoteur du cytomegalo virus) par exemple).

3/ je ne suis pas sur de cette réponse mais je pense qu'il n'y a pas de distinction entre un grand plasmide et un petit. La replication se fera au même endroit. Biensur cela est valable pour un procaryote. Un plasmide ne se replique pas chez un eucaryote.

J'espere avoir été assez clair.