Demande d'explication de résultat d'expérience

[Guigui51]

Bonjour, je vous met ci dessou l'expérience puis vous expliquerez mon probleme.

On mélange en quantité egale de l'ADN du bactériophage T4 marqué avec de l'azote 15, et de l'ADN froid du bactériophage T4. Le melange est chauffé a 95°c jusqua dénaturation complete, refroidi puis analysé par uultracentrifugation a lequilibre en chlorure de Césium ( centrifugation durant 48h a vitesse élevée ). 3 pics sont observé dans ces conditions.
Si on fais la même expérience cad melange ADN bacteriophage T4 marqué a lazote 15 et ADN froid du bactériophage T5, 2 pics seulement sont observés.

et ma question est: comment expliquez cette différences de pics? et quel sont les phenomènes qui sont mis en jeu dans cette différences.
Je me doute que le fait de mettre un bactériophage T5 a la place de T4 y est pour quelque choses mais j'arrive pas a avoir une explication concrete. et enfin quel est le but de cette expérience (là encore je me doute que sa doit être sur le role ou la fonction de l'ADN)?
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[kamor]

Dans ce cas, il faut que tu comprennes :
- ce qu'il se passe à 95°C
- ce qu'il se passe après quand la température diminue.

[Guigui51]

Justement, je vois pas ce qui pourrait ce passer puisque dans les deux cas c'est les mêmes conditions d'expérience, le seul parametre qui change c'est T5 a la place de T4...donc pour moi, c'est T5 qui est a l'origine de ce phenomere de difference de pics....

[Lopgor]

A moins que tu stabilise tes brins lorsque la température baisse tes brins vont se réassocier de manière aléatoire.

Tu aura donc:

ADN sans azote lourd

ADN avec un brin marqué à l'azote lourd

ADN avec les deux brins marqué à l'azote lourd

Pour la séconde c'est pareil sauf que apparament les deux brins ne parviennent pas à se reassocier de manière aléatoire.

on aurai donc:

ADN sans azote lourd

ADN avec les dux brin marqué à l'azote lourd

Mais je ne suis pas spécialiste. C'est peut être hors sujet. A toi de me le dire...

[A voir en vidéo sur Futura]

[piwi]

Non ton explication est correcte. Quand on chauffe on dénature l'ADN et quand on refroidit, l'ADN se renature grâce à la complémentarité des bases, un brin va s'hybrider avec un brin complémentaire qui se trouve dans le tube. Évidemment, l'ajout d'un composé lourd ne change rien à la complémentarité. Il faut bien voir que T4 et T5 ce n'est pas la même chose, il n'y a pas de complémentarité entre T4 et T5. Ainsi, dans le mélange T4 ne se réhybride qu'avec un autre T4 et idem pour T5. Pour plus de détail, voir plus haut.

Cordialement,
piwi

[Guigui51]

Merci a vous, donc si j'ai bien compris la difference de pic n'est autre que la conséquence des complémentarités?

[kamor]

En fait c'est plus l'impossibilité de complémentarité dans ce cas.
Les séquences sont différentes entre tes deux séquences d'ADN, peu importe le nom, et quand la température refroidit, le double brin d'ADN se reforme automatiquement. Si les séquences ne sont pas complémentaires, ce n'est pas stable, donc les deux brins se désassembleront jusqu'à trouver un brin complémentaire.