Bonjour à tous,
Voila, je suis actuellement en stage et j'étudie l’interaction de différentes protéines dans les cellules de Sertoli.
Je réalise marquage de ma protéine d'intérêt avec un anticorps primaire, puis un secondaire couplé au fluorophore.
Ensuite je réalise un marquage de l'actin en utilisant de la phalloidin couplé à un fluorophore. Je ne parviens pas à obtenir un marquage correct de l'actin. Mon maitre de stage pense que je réalise trop de rinçage après la phalloidin (alors que c'est dans son protocole).
Pensez vous que le problème peux venir de ca?Ou avez d'autres idées de problèmes?

PS: j'ai déjà éliminé le problème d’interaction avec les anticorps primaires et secondaires.

Merci beaucoup