IMPORTANT Conservation produits de PCR

[invited9357d9d]

Bonsoir,

Est ce que des produits de PCR (non purifiés) peuvent se conserver à -4°C pendant 1 nuit ou plus sinon pourquoi??

C'est très important, c'est pour savoir si je dois refaire ma PCR,

Merci beaucoup!!
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[Flyingbike]

une nuit, meme des jours !

[invited9357d9d]

ok!!! cool, merci beaucoup je suis rassurée...!!!

[kamor]

En fait on a longtemps considéré qu'il fallait tout conserver au congélateur un peu pour surprotégé nos précieux ADN, mais c'est un peu faux, et voire même abouti à l'inverse. La congélation entraine bien évidemment la formation de cristaux de glace qui vont possiblement endommager les molécules présentes dans le liquide. La congélation en soit n'est pas un problème (une fois que tout est pris, on va dire que rien ne bouge) le problème est à la formation des cristaux ainsi qu'à leur dissolution, donc il faut éviter de trop faire des cycles de congélation - décongélation.
A l'heure actuelle, beaucoup considèrent qu'en biologie moléculaire, ce sont les solutions mères qu'on peut conserver à -20°C et le reste à +4°C (plutôt que -4°C ou votre frigo est TRÈS déréglé ).
Là dans ton cas, la congélation n'aura pas une action trop grave, mais ce serait juste inutile.
Et n'oublie que c'est la Taq est prévue pour fonctionner à haute température, là elle est inactivée. Quand aux DNases, même si tu en avais, elles sont loin d'être dans des conditions optimales, leur activité est négligeable.

[A voir en vidéo sur Futura]

[Flyingbike]

ce qu'on peut faire dans le cas d'un produit de PCR qu'on veut déposer, c'est mettre du tampon de charge avec tris et EDTA après la PCR, ça se conservera d'autant mieux (au moins, on est surs que les DNases ne feront rien et que la Taq restera assise tranquillement dans son coin)