bonjour, voila j'ai un petit soucis d'interprétation de résultats de manipulation.
lors de ma manipulation, j'ai mit dans un tube du tampon glycine, de l'alcool déshydrogénase, de l'éthanol et de l'acide sulfurique.Le tout a incubé pendant 2H à 30°C puis j'ai ajouté le cofacteur NAD+. Par mesure par spectrophotométrie j'ai pu déterminer que j'avais une baisse de l'activité de l'enzyme (par rapport à une expérience précédente sans H2SO4). Moins de NADH a été formé.
j'ai plusieurs idées pour expliquer cela mais je ne suis pas sure de moi....
Je sais que la présence de groupement thiol -SH au sein de la protéine est importante pour son activité, donc est-ce que malgré que l'on soit dans du tampon, H2SO4 agirait sur ces groupements? En établissant des liaisons hydrogène ou en établissant des ponts disulfures par exemple. Ou bien, est-ce que H2SO4 agit directement sur l'éthanol en réalisant le réaction suivante : R-OH + H+ ==> R+ + H2O. Etant dans un milieu contenant un tampon, je en sais pas si cette réaction peut se faire....
Merci d'avance
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