Gamme et témoin BSA

[Laura14]

Bonjour,

Afin d'étudier l'activité d'une enzyme, nous commençons par le dosage des protéines présentent dans nos échantillons (je m'explique, notre enzyme est extrait de venin de guêpes, afin de pouvoir avoir la même quantité de protéines dans chacun de nos échantillons on réalise un dosage).

Nous utilisons une gamme étalon de BSA, jusque la aucuns problèmes. Ensuite lors de la mesure de l'activité enzymatique, plusieurs témoins sont utilisés et notamment le témoin où l'on remplace notre enzyme par de la BSA.
il est important que je sache pourquoi on réalise se témoin, je pensais cette explication :
la BSA est une protéine tout comme l'enzyme utilisée mais qui n'aura pas d'action (et donc aucune activité car elle et incapable d'hydrolyser le substrat).

Est-ce un bon raisonnement selon vous ou non ?

Merci d'avance
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[biseibutsu]

Bonjour,

Il me semble que c'est le bon raisonnement (en tout cas, j'ai le même). Cela peut également permettre de vérifier s'il y a contamination (si jamais il y a dégradation du substrat), donc un des témoins négatifs possible de réaliser.

[Laura14]

Merci. J'ai vérifié et on utilise bien la BSA comme témoin car elle n'a pas d'activité enzymatique, cela nous permet donc de vérifier que l'activité mesurée est bien du à l'ajout de l'enzyme et non à l'ajout de protéines !