membrane PVDF et methanol

[reine2paris]

Bonjour,

je suis en train de mettre au point une technique de western blot dans mon labo et je souhaiterai utiliser des membranes PVDF. J'ai lu qu'il fallait les faire tremper dans le méthanol pur avant de les utiliser. faut-il les laisser tremper 5 min, 1 nuit ou plus?
Ma question se situe surtout au niveau du tampon, est-ce qu'il doit contenir 20% de méthanol comme pour les membranes nitrocelluloses? ou pas du tout de méthanol. j'ai lu des choses différentes et je ne sais pas trop quoi en penser.

Merci pour vos lumières.
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[TanguyE]

Bonjour,

Dans tous les labos où je suis passé, le méthanol pour l’imprégnation des membranes a été banni du fait de sa toxicité. Il est remplacé par de l’éthanol 100%.

Pour les membranes, il suffit juste de les tremper 30 secondes/1 minute dans l'éthanol et ensuite les passer dans l'eau avant de les mettre dans le sandwich.

Cordialement

[Flyingbike]

tout pareil, dans l'activation de la membrane comme dans le tampon de transfert, le methanol est substituable par de l'EtOH100%.

bonne journée

[reine2paris]

Merci d'accord il vaut mieux utiliser l’éthanol que le méthanol. Mais pourquoi utilise t'on ses solutions avant le transfert, je pense que c'est pour une sorte d'activation mais concrètement cela fonctionne comment?
au niveau du tampon, il faut bien utiliser 20% d'éthanol, car j'ai lu des articles où ils ne mettaient pas d'éthanol dans le tampon sur une membrane PVDF. alors je me pose des questions

[A voir en vidéo sur Futura]