Bonjour,
Je vais encadrer un TP en biologie cellulaire, reprenant ce qui avait été fait par un prédécesseur, je m'interroge et vient trouver votre aide !
En résumer, on va étudier l'apoptose de cellules sanguines en présence de différents réactifs.
Une partie de l'étude va être sur l'ADN fragmenté, sauf que sur le protocole que j'ai, à aucun moment il n'y a d'étape pouvant libérer l'ADN !
Protocole :
- centrifuger les cellules et éliminer le surnageant
- ajouter 40 µl de TE
- ajouter 1 µl de RNase A
- incubation à 37°C puis migration sur agarose
Vous être d'accord avec moi qu'il manque quelque chose ?!
Je pensais rajouter une étape SDS-HCl après la 1ère centri, mélanger doucement, centri et là récupérer le surnageant contenant l'ADN (si je ne me trompe pas) et faire migrer ça même si l'extrait n'est pas pur, je veux juste voir l'état de mon ADN.
Pensez-vous que ce protocole rapide tienne la route ?
Merci d'avance !
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