choix des primers pour PCR

[nadia1985]

bonjour a tous
je dois faire une PCR pour une amplification de gene d une topoisomerase de campylobacter jejuni est ce que quelau un peut me dire sur quoi je dois me fier pour choisirs les primers car j ai jamais fait de PCR
merci a tous
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[Flyingbike]

commencez par trouver la séquence/la référence du gène

c'est pour quantifier le transcrit ou juste le gène ?

[nadia1985]

la sequence du gene je l ai et c est pour amplifier la sequence du gene

[Loupsio]

Si tu as la séquence et que tu sais comment fonctionne le principe de l'amplification par PCR, ou est le problème qui t'empêche de déterminer les primers?
par ou commencerai tu? a quoi pense tu que doivent correspondre tes primers, ? a quoi vont te servir tes primer?
commences par te poser les bonnes questions, et quand tu auras identifié qu'est ce qui te bloque, les personnes du forum pourrons t'aider

[A voir en vidéo sur Futura]

[nadia1985]

bein c est sa je connais ma sequence mais je sais pas de combien doivent etre mes primers

[Loupsio]

Il va falloir faire des effort d'explication

vous ne savez pas combien quoi???
si c'est le nombre de primer a faire que vous cherchez, il en faut 2, un de chaque coté de la séquence
si c'est le nombre de nucléotides que vous cherchez, alors votre problème n'est pas un problème de compréhension, mais un problème de recherche, car il faut vraiment ne pas se fouler pour ne pas avoir trouvé l'info par une rapide recherche sur internet
une recherche google avec les mots clés : "design primer taille " vous aurait donné l'info en moins de temps qu'il ne vous a fallu pour écrire votre question ici

En sciences si vous ne commencez pas a faire vos recherche par vous même vous n'irez pas bien loin, demander de l'aide est une chose, ne rien faire par soi même et attendre que quelqu'un fasse pour vous, c est autre chose