Bonjour à tout le monde,
C'est vraiment génial d'avoir un forum comme celui-ci quand on est étudiant alors je pense que je vais en profiter un maximum ! J'espere que quelqu'un va pouvoir m'apporter ses lumières ?!
Je voudrais connaître la différence entre un slot blot et un western blot et quelles info suplémentaires peut apporter un western blot par rapport à un slot blot?
Merci d'avance
heu...
Globalement la technique est la meme, ou plutot le principe est le meme. La différence est que pour le slot blot (ou dot blot) on n'expose pas toute la membrane à notre substance à analyser...
Imagine que tu aies plusieurs patients et que tu veuilles tester la 14-3-3 histoire de voir s'il ils ont un Alzeimer (je ne suis pas sur qu'il existe un anticorps contre cette molécule, mais c'est histoire d'avoir un exemple). Tu fais les extraction et purifications nécessaires du CSF et pour chaque patient, tu déposes un spot de ce que tu as obtenu sur ta membrane. Tu utilise ton anticorps et comme ca tu peux détecter pour chaque patient la présence ou non de ta protéine cible.
L'avantage su slot blot, c'est bien sur la rapidité de la manip. Par contre, le western blot apporte une information supplémentaire, la masse de la protéine liée par l'anticorps. Cela peut être très utile pour éviter d'avoir des faux positifs : si tu cherches une protéine de 30 kDa et que ton western révèle une protéine de 80 kDa, tu sais que c'est un faux positif. En slot blot, tu ne le sauras pas.Envoyé par La chieuse
Ca peut aussi être interessant quand tu as des modifications post-traductionnelles. En western, tu pourras par exemple voir que seule une forme phosphorylee d'une proteine est reconnue, ce qui peut etre interessant d'un point de vue fonctionnel
merci, merci, merci,
Est-ce que grace à l'electrophorèse du western blot on peut avoir une idée de la taille et de la quantité de protéine recherchée?
En fait mon message précédant est nul (jsui un peu creuvé c'est bientôt les partiels). Alors merci encore !!!
bonjour, je trouve pas que ton derniere message soit nul au contraire, il soulève un point important.
bcp de gens pensent que le western blot est une méthode quantitative alors que non.
cette methode permet de comparer l'expression d'une protéine d'un puit à l'autre d'un point de vue qualitatif mais ne donne aucune info concernant la quantité de protéine présent dans l'extrait.
