Méthode Elisa

[Lio22]

Salut, est-ce que quelqu'un pourrait me donner un bon site ou de la documentation sur la méthode elisa??
Le principe, les différentes opérations, la lecture des résultats... bref un maximum d'informations...
Merci beaucoup!!
Lio

[sossolabrune]

il faut fixer les protéines du virus au fond de puits, verser le sérum à tester dans ceux-ci; il y a alors fixation ou nn des anticorps sur la protéine puis on révèle la présence des anticorps grâce à des molécules couplées à une enzyme.

[Toll]

Bonjour,

la méthode ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) est une méthode immunologique utilisée en routine dans les labos de recherche et en diagnositque (dépistage HIV par exemple).

Comme ta question est très vague, pour éviter de donner une réponse trop longue, je te conseille le lien suivant en première donnée:
http://en.wikipedia.org/wiki/ELISA

L'avantage de la méthode ELISA est:
1) détection spécifique d'un antigène recherché par l'utilisation d'anticorps spécifiques.
2) mesure quantitative grâce à la réalisation d'une gamme (standard) en parallèle.
3) faible taux de détection (sensibilité) de part l'utilisation d'anticorps secondaires qui vont "démultiplier" le signal.

La technique ELISa la plus couramment utilisée est la méthode dite "sandwich". mais il en existe d'autres (ELISA compétitif par ex)
brièvement, pour détecter un antigène A:
1) étape de coating: on dépose au fond du puits, des anticorps (Ac) anti-A (ces Ac sont appelés Ac de capture).
2) étape 2: dépot de l'échantillon a analyser. l'antigène (si présent) sera capter par les Ac.
3) étape 3: ajout d'anticorps anti-A (différents des premiers Ac utilisés) (ces Ac sont appelés Ac de détection). l'antigène se trouve pris en sandwich entre l'Ac de capture et l'Ac de détection.
4) ajout d'anticorps secondaires qui vont reconnaitre les Ac de détection. cela a pour but d'augmenter le signal et donc d'améliorer la sensibilité du test. Ces Ac sont couplés à une enzyme.
5) détection finale des anticorps secondaires par l'ajout d'un substrat. ce substrat chromogène va être métabolisé par l'enzyme accrochée à l'Ac secondaire et donner une couleur.

généralement, dans un test ELISA, plus la couleur est foncée, plus il y a d'antigène dans le puits et donc dans l'échantillon analysé.

en espérant avoir été clair et pas trop long...

[Lio22]

Saluttt, très clair Tool!! merci beaucoup pour ton aide!!
A bientôt!
Lio

[httchristian.grasland.fre]

Bonjour,

http://www.ogm.org/pages/showogm.php?cat=04&ogmid=60

http://www.agrireseau.qc.ca/grandesc..._Desmarais.pdf

http://www.bib.fsagx.ac.be/library/b...t/v4n4/208.pdf

http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/ATP/immu6el1.htm

http://www.jeulin.fr/sites/jeulin/Ca...15030.aspx?o=S

http://www.canlyme.com/frbottom.html

Déjà que le Canada est loin derrière avec le test de dépistage ELISA qu’on persiste à imposer aux citoyens canadiens et aux Québécois. La faible sensibilité du test ELISA ne permet pas d’identifier la bactérie du Lyme et est d’une inefficacité notoire connue dans les milieux spécialisés. La ILADS (International Lyme And Associated Diseases Society) note : « Le test ELISA est sujet à caution et laisse échapper 35% des résultats qui devraient être positifs (seulement 65% de sensibilité!). Ce qui est inacceptable pour un test de dépistage (par définition un test de dépistage doit avoir au moins 95% de sensibilité) ».

Moi j'en veu d'autre Merci à bientot

[doudoux36]

salut
je voudrais savoir le rapport entre l EPO et la methode elisa
merci

[Toll]

bonjour,
l'EPO (ou erythropoïétine) est une protéine.

L'ELISA est une technique de quantification protéique couramment utilisée en labo.

le seul rapport que je pourrais trouver est que la technique ELISa est une des techniques utilisées pour quantifier la quantité d'EPO présente dans l'échantillon analysé.

[httchristian.grasland.fre]

auriez vous d'autre lien, ou d'autre document? je suis toujours, demandeur

[Vinc]

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Déjà que le Canada est loin derrière avec le test de dépistage ELISA qu’on persiste à imposer aux citoyens canadiens et aux Québécois. La faible sensibilité du test ELISA ne permet pas d’identifier la bactérie du Lyme et est d’une inefficacité notoire connue dans les milieux spécialisés. La ILADS (International Lyme And Associated Diseases Society) note : « Le test ELISA est sujet à caution et laisse échapper 35% des résultats qui devraient être positifs (seulement 65% de sensibilité!). Ce qui est inacceptable pour un test de dépistage (par définition un test de dépistage doit avoir au moins 95% de sensibilité) ».

Pour ta gouverne, j'ai eu la maladie de Lyme et j'ai été diagnostiqué grace à un ELISA.....
Lorsque l'on y connait rien, on s'abstient de dire des énormités basées sur des sites plus que douteux et dont les auteurs n'en connaissent pas plus que le quidam...

Vinc

[httchristian.grasland.fre]

Je n’ai aucunement voulu heurter ta sensibilité. Si tu réfléchis bien tu n’apporte aucun apport au sujet. Si tu as quelque chose à démontrer sur le teste Elisa on t’écoute. J’ai demandé de la documentation c’est pour me faire un avis. Mon avis qui est le mien est que la sensibilité du Teste Elisa n’est pas a la mesure de la recherche. Tu ne viens sur ce fil que pour me boucher le bec alors que je ne demande que plus de savoir. Clore le débat en est intéressant de m’évincer du Forum. Je n’ai jamais voulu faire de mal à qui que ce soit. La discutions que tu a évincer du forum ce matin était de même « Téléthon et Eugénisme êtes vous d’accord ? » Pourtant une question d’actualité. Un sondage et une question non pas contre science mais pour la science. Tu te dis avoir le savoir alors pourquoi la tu, évincé ? Tu prête surtout attention à tout ce qui peut faire mal à la science. Anéantir ce qui peut prêter préjudice. Tu choisis donc qui doit vivre ou mourir, voilà ta science prédictive, ton eugénisme. Ici ce n’est pas moi qui gouverne c’est toi et tu ne le prouve aucunement par ta science et ta connaissance du sujet. Tu ne le prouve que par tes agissements à choisir ce qui tes néfastes personnellement sans t’intéresser au groupe. Tu va encore le prouver en effaçant ce poste que la science peut être dans l’eugénisme(passe la main a un autre modérateur tu en sera excuser). Merci d’avoir répondu en dictant que vous n’empêchiez pas les gens de poser les questions. Je n’ai aucunement critiqué une manifestation et des recherches mondialement, humainement et scientifiquement reconnues. Sur dix personnes qui ont lu le post trois auquel j’ai fait passer mes remarques sur tes actions à mon égard en attestent.

Christian

[Vinc]

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Je n’ai aucunement voulu heurter ta sensibilité. Si tu réfléchis bien tu n’apporte aucun apport au sujet. Si tu as quelque chose à démontrer sur le teste Elisa on t’écoute.

Je n'ai pas à démontrer quoi que ce soit. Le test ELISA est universellement reconnu par la communauté scientifique que ça te plaise ou non. Et je pense avoir suffisamment de recul (ou en tout cas plus que quelqu'un dont ce n'est pas le métier) pour dire si oui ou non une technique de bioch est fiable.

Envoyé par httchristian.grasland.fre

J’ai demandé de la documentation c’est pour me faire un avis. Mon avis qui est le mien est que la sensibilité du Teste Elisa n’est pas a la mesure de la recherche.Tu ne viens sur ce fil que pour me boucher le bec alors que je ne demande que plus de savoir.

Tu es chercheur?? Tu utilises l'ELISA??? Je ne crois pas...
Alors à mon avis lorsqu'on est pas compétent on ne se ramène pas en critiquant une technique qui a fait ses preuves depuis des années... Un peu d’humilité ça fait pas de mal.

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Clore le débat en est intéressant de m’évincer du Forum. Je n’ai jamais voulu faire de mal à qui que ce soit. La discutions que tu a évincer du forum ce matin était de même « Téléthon et Eugénisme êtes vous d’accord ? » Pourtant une question d’actualité. Un sondage et une question non pas contre science mais pour la science. Tu te dis avoir le savoir alors pourquoi la tu, évincé ? Tu prête surtout attention à tout ce qui peut faire mal à la science. Anéantir ce qui peut prêter préjudice.

Bon alors là on va mettre les choses au point tout de suite. Je t'ai déjà répondu par MP. Si tu as des remarques suite à ce MP je suis prêt à en discuter mais par contre les échanges privés doivent rester privés.
Tu m'attaques personnellement et ça je ne l'accepte pas. Que tu ne m'aimes pas c'est ton droit, que tu remettes en causes ma modération également mais en aucun cas je n'accepte ces attaques en public et tu es au bord de la prémodération (ce n'est plus à moi de décider).
Et oui je défend la Science parce que j’ai plus de recul que toi (quoi que tu puisses en penser) pour juger si ce que tu dis mérites réflexion ou pas : que tu l’acceptes ou non, je suis biologiste, c’est mon métier et je sais de quoi je parle, point final.

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Tu choisis donc qui doit vivre ou mourir, voilà ta science prédictive, ton eugénisme. Ici ce n’est pas moi qui gouverne c’est toi et tu ne le prouve aucunement par ta science et ta connaissance du sujet. Tu ne le prouve que par tes agissements à choisir ce qui tes néfastes personnellement sans t’intéresser au groupe.

Oui bien sûr je sais.... Je suis un gros michant modérateur qu fait rien qu'embêter les gens qui posent des questions. Contrairement à ce que tu penses je n'ai aucun droit si ce n'est celui décider qu'une discussion est hors de propos du point de vue scientifique et tu m'excuseras mais balancer comme ça " Vous croyez pas que les méchants chercheurs profitent de l'argent du Téléthon pour faire de l'eugénisme???" ce n'est pas moral et acceptable du point de vue des patients. Pose leur la question et on en reparle….
En gros tu demandes si le Téléthon est utile ou pas….. on a eu de la chance, t’aurai carrément pû demander pourquoi il existe….

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Tu va encore le prouver en effaçant ce poste que la science peut être dans l’eugénisme(passe la main a un autre modérateur tu en sera excuser). Merci d’avoir répondu en dictant que vous n’empêchiez pas les gens de poser les questions.

Juste pour montrer que tu ne me connais absolument pas : non, ce post ne sera pas effacé. Et je ne passerai pas la main non plus vu que c’est mon job de modérer et que les autres modos sont d’accord avec moi sur ton cas….

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Je n’ai aucunement critiqué une manifestation et des recherches mondialement, humainement et scientifiquement reconnues. Sur dix personnes qui ont lu le post trois auquel j’ai fait passer mes remarques sur tes actions à mon égard en attestent.

N’importe quoi…. Tu as eu une seule réponse et la personne te demandais si la question était « Est-on pour l’eugénisme ?? » (ça prouve quand même que ta question était tout sauf claire….). Si tu leur a demandé en PV alors je me demande bien comment parce que tu ne peux savoir qui a consulté ton post si ils n’ont pas répondu…. Et d’autre part ça fait preuve d’une belle mentalité : quelqu’un n’est pas d’accord avec toi alors tu vas recruter du monde, l’union fait la force c’est ça ???

Si tu voulais en discuter j’étais prêt à le faire.

Maintenant je te conseille fortement de te calmer parce que tu es dans le collimateur de la modération : les attaques personnelles sont particulièrement mal vues…

Vinc

[JPL]

On n'est pas là pour agresser les participants. En outre tu mélanges plusieurs choses : une intervention faite par Vinc à titre personnel (comme n'importe quel autre participant) et ce qu'il peut faire à titre de modérateur. En plus tu fais référence à une autre discussion, ce qui n'a rien à faire ici.

J'interviens maintenant comme modérateur en citant la charte du forum :

Tout acte de modération est écrit en vert ; dans les autres cas les modérateurs s'expriment à titre personnel. Les critiques ou les commentaires sur la modération doivent être effectués en privé.

Merci de bien vouloir t'en souvenir.
Quant à l'amorce de discussion qui a été supprimée, elle provient du fait que tu faisais référence à l'opinion récemment exprimée par des évêques. Nous n'acceptons pas de discussion fondée sur des opinions religieuses, qu'on soit pour ou contre, le problème n'est pas là, parce que l'expérience nous a montré que cela dégénère immanquablement. Autre citation de la charte :

Etant sur un forum scientifique, les discussions religieuses ou politiques ne sont pas tolérées.

[Gwyddon]

Un bon rappel de la charte s'impose pour httchristian.grasland.fre :

_ Les attaques personnelles et autres insultes sont interdites.

_ Les critiques de la modération doivent se faire en privé.

Soit vous vous calmez, soit vous êtes sanctionné.

Pour la modération,

Gwyddon

[yoda1234]

httchristian.grasland.fre dois je te rappeler qu'en t'inscrivant sur ce forum tu as accepté de respecter la charte de ce forum:

Vous pouvez critiquer les idées, mais pas les personnes.

Alors je te prie de rester correct avec tes interlocuteurs. De plus tu as critiqué un acte de modération ce qui est interdit par cette même charte:

Les critiques ou les commentaires sur la modération doivent être effectués en privé.

Cela fait beaucoup de choses pour un seul fil et un seul intervenant: j'espère que tu va te calmer de façon a ce que ce fil continue sereinement.

[httchristian.grasland.fre]

Bonsoir,

Merci d’avoir laisser le fil en état. Merci de le laisser comme il est avec votre intervention de modérateur. J’ai plus de réponses à mes questions que dans le MP. Je demande juste à comprendre. On ne répond aucunement a mes demandes. On fait passer mes demandes pour de l’intolérable. Pour ma signature je n’ai fait que la remettre comme elle était avant. Entre avant et maintenant ce qui est écrit n’est plus tolérer comment puis-je le savoir en cliquant des doigts. Pour l’attaque personnelle je la croix toujours méritée car il n’a pas répondu à la discutions. Il a voulu l’évincer et m’évincer à la suite de mon autre discutions. Vous êtes modérateur regarder bien la discutions ou alors, je ne comprends pas.

N’enlever pas la modération de cette discutions Merci

Je reviens plus instruit donc merci. christian

[Gwyddon]

Envoyé par httchristian.grasland.fre

Pour l’attaque personnelle je la croix toujours méritée car il n’a pas répondu à la discutions.

C'est ça pour vous la conception d'une discussion ? Attaquer personnellement lorsque l'autre ne vous répond pas dans le sens où vous l'entendez ?

Changez vite de comportement alors...

[httchristian.grasland.fre]

Me revoila,

Pourquoi ! c’est à moi de changer? Attaquer, mais je vois que je n’ai fait que me défendre, peut être mal venue vue la chartre. Mais alors la chartre ne devrait-elle pas comporter aucune attaque personnelle d’un modérateur personnellement sur une discutions, comme celle ci.

Salut je quitte. Le bonheur c'est d'être ensemble

[Yoyo]

Je cloture cette discussion brillante, par une fermeture etincellante.

Yoyo