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Densité optique ?




  1. #1
    merins

    Lightbulb Densité optique ?

    Bonjour tout le monde ;

    Dans un TP de biochimie intitulé « effet de la température et du pH sur l’activité béta-gal » on a fait une étude de la stabilité de l’enzyme vis à vis de la température :
    Test d’activité :
    1) traitement thermique de l’enzyme : incubation pd 30 min à différente température (4, 25, 30, 40, 60, 80 °C)
    2) on ajoute à chaque préparation du substrat ONPG et du Tp A
    3) On fait à chaque préparation une incubation à 40°C pd 10 min et on ajoute du Tp Carbonate pour arrêter la réaction et on mesure la densité optique à 420 nm

    Pour 4°C --> D.O. = 0.714
    Pour 25°C --> D.O. = 0.711
    Pour 30°C --> D.O. = 0.709
    Pour 40°C --> D.O. = 0.710
    Pour 60°C --> D.O. = 0.095
    Pour 80°C --> D.O. = 0.025

    Pourquoi la D.O. maximale est celle à 4°C ? car à mon avis la D.O. maximale doit être à 40°C car c’est la température optimale pour l’activité enzymatique de l’enzyme béta-gal

    Merci d’avance

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    Mecton

    Re : Densité optique ?

    Salut,

    Pourquoi la D.O. maximale est celle à 4°C ?
    Dans un 1 er temps il faut tenir compte des souces d'erreur potentielles faisant varier la DO, quantifier l'incertitude. Ce que je veux dire c'est qu'à mon sens il n'y a pas de différence significative entre une DO =0.714 et une autre DO =0.710.
    Je pense qu'il suffit de se demander dans quel organisme trouve t'on cette enzyme et est ce cohérent avec les résultat obtenues.

    Cordialement,

  4. #3
    Jean.Marc

    Re : Densité optique ?

    Bonjour,
    c'est aussi ce que je pense :
    Une différence de 0.001 DO est très petite et les photomètres ne sont pas précis à ce point pour la plupart.
    En fait les 4 premières mesures sont identiques au bruit près ; en revanche, à des températures plus élevées, on constate une chute importante de la DO.


  5. #4
    jmbowie

    Re : Densité optique ?

    Citation Envoyé par merins Voir le message
    Bonjour tout le monde ;

    Dans un TP de biochimie intitulé « effet de la température et du pH sur l’activité béta-gal » on a fait une étude de la stabilité de l’enzyme vis à vis de la température :
    Test d’activité :
    1) traitement thermique de l’enzyme : incubation pd 30 min à différente température (4, 25, 30, 40, 60, 80 °C)
    2) on ajoute à chaque préparation du substrat ONPG et du Tp A
    3) On fait à chaque préparation une incubation à 40°C pd 10 min et on ajoute du Tp Carbonate pour arrêter la réaction et on mesure la densité optique à 420 nm

    Pour 4°C --> D.O. = 0.714
    Pour 25°C --> D.O. = 0.711
    Pour 30°C --> D.O. = 0.709
    Pour 40°C --> D.O. = 0.710
    Pour 60°C --> D.O. = 0.095
    Pour 80°C --> D.O. = 0.025

    Pourquoi la D.O. maximale est celle à 4°C ? car à mon avis la D.O. maximale doit être à 40°C car c’est la température optimale pour l’activité enzymatique de l’enzyme béta-gal

    Merci d’avance
    Sauf que c'est très différent de faire une réaction à 4°C et de pré-incuber l'enzyme AVANT la réaction....si ca peut te donner une piste...

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