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Congélation de levures



  1. #1
    .::nina::.

    Congélation de levures

    Bonjour à tous,

    Je pose ma question en espérant qu'un levuriste passe dans le coin.

    Je souhaite conserver des souches de mes levures (portant 2 plasmides d'intérêt, double hybride en préparation) à -80°C.

    Elles ne seront pas transformées par la suite.
    Mes questions sont les suivantes :

    Quel protocole me conseillez-vous? Dois-je utiliser du glycérol? Quels milieux, ... ?

    Merci par avance,
    ++

    Nina

    -----


  2. #2
    Yoyo

    Re : Congélation de levures

    Salut

    Tu fais pousser tes levures en milieu selectif sur la nuit pour avoir une culture bien dense.
    Ensuite tu les congeles dans une solution 20% de glycerol final et tu les mets a -80°c

    YOyo

  3. #3
    .::nina::.

    Re : Congélation de levures

    merci! et quand tu dis "solution" ca peut etre H2O? TE? milieu selectif, ie CSM-x-y, YPG?

  4. #4
    Yoyo

    Re : Congélation de levures

    Salut

    Ta culture est faite en milieu selectif (CSM-x-y... ou YNB+Z+x)
    ton glycerol tu fais une solution stock 60% dans de l'eau.
    Puis tu melanges 1/3 de glycerol + 2/3 de ta culture de nuit. Tu mélanges bien en retournant le tube fermé, et tu congeles.

    YOyo

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