Bonjour à tous,
Je pose ma question en espérant qu'un levuriste passe dans le coin.
Je souhaite conserver des souches de mes levures (portant 2 plasmides d'intérêt, double hybride en préparation) à -80°C.
Elles ne seront pas transformées par la suite.
Mes questions sont les suivantes :
Quel protocole me conseillez-vous? Dois-je utiliser du glycérol? Quels milieux, ... ?
Merci par avance,
++
Nina
Salut
Tu fais pousser tes levures en milieu selectif sur la nuit pour avoir une culture bien dense.
Ensuite tu les congeles dans une solution 20% de glycerol final et tu les mets a -80°c
YOyo
merci! et quand tu dis "solution" ca peut etre H2O? TE? milieu selectif, ie CSM-x-y, YPG?
Salut
Ta culture est faite en milieu selectif (CSM-x-y... ou YNB+Z+x)
ton glycerol tu fais une solution stock 60% dans de l'eau.
Puis tu melanges 1/3 de glycerol + 2/3 de ta culture de nuit. Tu mélanges bien en retournant le tube fermé, et tu congeles.
YOyo
