Bonjour,
je dois déterminer un protocole pour mettre en évidence la distribution de NFKB entre le cytoplasme et le noyau.Je dois utiliser le fractionnement cellulaire couplé à l'immunodétection après électrophorèse ( western blot).
Moi j'aurai d'abord fait le fractionnement cellulaire puis j'aurai mis mon broyat en présence d'anticorps primaires contre NFKB et secondaires contre l'anticorps qui s'est fixé sur NFKB.
Mais je ne sais pas à quel moment faire mon western et quel en est l'interet?Vérifier la pureté de mes fraction peut etre?
Merci
-----