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Migration dans la mauvaise direction...



  1. #1
    Hemiplegiane

    Migration dans la mauvaise direction...

    Bonjour,

    Je réalise actuellement des expériences en laboratoire et j'ai quelques problèmes avec la migration de mes échantillons après purification sur le gel d'agarose.
    J'ai effectué une PCR sur 6 échantillons (chacun avec des primers différents), j'ai contrôlé son efficacité avec une electrophorèse sur gel d'agarose 2%, les résultats se sont avérés positifs (bande unique et de la bonne taille pour chacun des 6 échantillons).
    J'ai voulu purifier ces échantillons pour pouvoir les utiliser par la suite pour une nouvelle PCR (pour regrouper les différents fragments obtenus).
    J'ai réalisé une purification avec le protocol et kit QIAquick de QIAGEN("QIAquick gel extraction kit protocol" avec microcentrifuge) mais lors de la révélation du gel de l'electrophorèse j'ai pu constaté que tous mes échantillons avaient migré dans le sens opposé habituel, se retrouvant au dessus des puits.
    J'ai recommencé la purification et j'ai obtenu les mêmes résultats...

    Quelqu'un aurait-il une explication?

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    Vinc

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    Vous avez certainement inversé vos électrodes....

    V.
    Primum non nocere.

  4. #3
    Yoyo

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    D'accord avec vinc, c'est un classique avec d'ancienne cuve symétrique

    YOyo

  5. #4
    Hemiplegiane

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    Merci pour la proposition mais en plus d'avoir vérifié les bornes, le marqueur de taille a migré dans la bonne direction...

  6. #5
    Vinc

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    Alors c'est peut-être un problème de charge des échantillons...
    Je ne connais pas ce kit, peux pas dire.


    V.
    Primum non nocere.

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    Yoyo

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    salut

    Ca me semble assez suréaliste quand meme! les échantillons qui migrent dans le mauvais sens???

    tu es dans quoi comme tampon? TBS? TAE?

    YOyo

  9. Publicité
  10. #7
    jmbowie

    Re : Migration dans la mauvaise direction...

    Citation Envoyé par Yoyo Voir le message
    salut

    Ca me semble assez suréaliste quand meme! les échantillons qui migrent dans le mauvais sens???

    tu es dans quoi comme tampon? TBS? TAE?

    YOyo
    Surtout quand le ladder migre dans le bon sens.

    Le problème est-il reproductible ?
    Blast up your life!

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