Chromatographie sur colonne

[invite31dafa6a]

Bonjour,

On veut détecter les protéines par la méthode de Bradford.

On a fait une gamme étalon de l'absorbance de BSA colorée au réactif de Bradford : mais c'est quoi le BSA ? quelle est son utilité ? il est censé "représenter" une protéine ?

A partir de cette gamme étalon, on fait une courbe étalon Abs=f(quantité de protéines)

Puis on revient au fractions de notre expérience : on y ajoute du réactif de Bradford, et on mesure l'absorbance à 595 nm de chaque fraction.
On nous demande de calculer la quantité de protéines dans chaque fraction, et d'expliquer le calcul....

Je ne comprends pas comment la calculer, je pensais juste trouver les résultats grâce à la courbe étalon (sinon à quoi elle sert?), mais à priori ce n'est pas comme ça.

Quelqu'un a une idée du calcul à utiliser ?
Merci par avance
jeansteiff
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[invite2d9e8164]

Salut !

La BSA c'est du sérum albumine bovine. Autrement dit c'est de l'albumine quoi...
Et oui je pense que c'est la protéine de référence pour le dosage ici.

Sinon je pense exactement comme toi : Il faut utiliser la droite d'étalonnage pour trouver la quantité de protéine. Il n'y a aucune autre manière (ou peut être trouver l'équation de ta droite et calculer avec ça mais franchement ça sert à rien vu la précision de la méthode ).

[invite31dafa6a]

merci pour ta réponse, j'ai essayer avec la courbe mais cela me donne des valeurs incohérente avec les précedente