Salut,
J'ai besoin de votre aide pour resoudre l'exercice suivant:
Vous voulez preparez des PBMC(lymphocytes et monocytes) afin de les utiliser dans test Elispot.Vous diluez 3mL de sang humain au tiers,puis le superposez au-dessus de 5mL de Ficoll.Apres centrifugation vous recueillez l'interface(4mL) et la lavez 2 fois avec du PBS(6mL).Vous reprenez le culot cellulaire dans 2 mL de tampon.
Vous diluez un echantillon au 1:2 dans du bleu du trypan et vous le comptez dans un hemocytometre.
Il y a 25 cellules :22 vivantes et 3 mortes.Ces cellules sont reparties dans 5 carres parmi les 25 carres de l'hemocytometre.
1/Quelle-est la concentration cellulaire du culot cellulaire purifie et resuspendu?
C1=25*2*10000/5*4=25000 M/mL,mais c pas logique!!!
2/Si les globules blancs de cet individu sont a une concentration de 7.5 M/mL et 25% sont du PBMC,quel est le rendement de votre experience?
La concentration de PBMC :C2=7.5*25/100=1.875M/mL
Rendement=(C1/C2)*100=....J'ai besoin de C1
3/Si vous devez preparez une plaque de 96 puits de cellules a 10000/puits(50microlitres),comment devez vous proceder?
La,j'ai aucune idee.
Merci d'avance.
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