bonjour monsieur
pouvez-vous m'explique pour quoi un plasmide artificiel contient des gènes des résistance et un gène de lac z (le rôle de B_galactosidase) et les polylinkers merci
-----
Dernière modification par LXR ; 10/04/2010 à 23h36.
Motif: Titre
10/04/2010, 16h09
#2
invite94397744
Date d'inscription
janvier 1970
Messages
6
Re : bousoin d'aide
pour facilite la qst : g pas compris esk l'ADN étranger peut se fixe dans l'un des 2 site des gènes de résistance
et comment sélectionner les plasmides récombinants
10/04/2010, 22h56
#3
jmbowie
Date d'inscription
avril 2006
Âge
41
Messages
992
Re : un plasmide artificiel
Envoyé par lamine-bio
bonjour
pouvez-vous m'explique pour quoi un plasmide artificiel contient des gènes des résistance et un gène de lac z (le rôle de B_galactosidase) et les polylinkers
pour facilite la qst : g pas compris esk l'ADN étranger peut se fixe dans l'un des 2 site des gènes de résistance
et comment sélectionner les plasmides récombinants
merci
Un plasmide artificiel (vecteur) porte un ou plusieurs gènes de résistances pour sélectionner des cellules qui dans lequel ce plasmide est introduit. Le gène lacZ permet soit d'identifier facilement les cellules portant un vecteur avec un insert de celles dont le vecteur est vide (criblage bleu/blanc comme pour le vecteur pUC18). Le polylinker est une zone riche en sites uniques de restriction, ce qui y facilite l'introduction d'un fragment ADN par ligation.
Blast up your life!
10/04/2010, 23h38
#4
LXR
Date d'inscription
avril 2007
Localisation
Genève (CH)
Messages
3 733
Re : Plasmide génie génétique
Bonjour,
Un titre explicite est exigé lorsqu'on ouvre une discussion. Si cela se renouvelle, la discussion concernée sera fermée le temps que tu me proposes un titre convenable par message privé.
D'autre part, évites le langage sms qui est interdit sur le forum.
LXR pour la modération
Aujourd'hui
A voir en vidéo sur Futura
10/04/2010, 23h44
#5
LXR
Date d'inscription
avril 2007
Localisation
Genève (CH)
Messages
3 733
Re : Plasmide génie génétique
Les gènes de résistance permettent de sélectionner les bactéries qui ont intégré le plasmide, sur milieu sélectif (c'est à dire milieu nutritif + antibiotique le plus souvent) :
- Bactérie sans plasmide : meurent
- Bactéries avec plasmide : survivent
Le polylinker est une région contenant de nombreux sites de restriction qui vont permettre l'intégration de l'insert dans le plasmide.
Le gène LacZ est souvent présent dans le plasmide pour sélectionner les plasmides contenant un insert. Dans ces cas là, le polylinker est présent dans le gène LacZ. L'intégration d'un insert au niveau du polylinker a donc pour effet d'invalider la beta-galactosidase. Dans le milieu nutritif on ajoute du X-Gal qui est un substrat de la beta-Galactosidase et qui devient bleu lorsqu'elle le transforme.
Résultat : - Bactérie sans insert (donc avec beta-Galactosidase) : bleues.
- Bactéries avec insert (sans beta-galactosidase) : blanches.
Si on combine antibiotique et X-Gal dans le milieu nutritif, les bactéries qui auront poussé et qui seront blanches auront intégré un plasmide contenant un insert. Cela permet d'accélérer le criblage des bactéries qui nous intéressent.
11/04/2010, 00h00
#6
LXR
Date d'inscription
avril 2007
Localisation
Genève (CH)
Messages
3 733
Re : Plasmide génie génétique
Lamine-bio, j'ajoute que les doublons sont interdits sur le forum. Cela occasionne une désorganisation du forum et c'est irrespectueux vis à vis des autres membres.
LXR pour la modération
Dernière modification par LXR ; 11/04/2010 à 00h03.